供貨周期 |
現(xiàn)貨 |
應(yīng)用領(lǐng)域 |
醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 |
TRAP染色主要常用于EDTA脫鈣的骨組織內(nèi)破骨細(xì)胞 |
TRAP染色是用于檢測骨組織、骨細(xì)胞中特征物質(zhì)的染色,使破骨細(xì)胞呈紅色,背景呈綠色或藍(lán)色,??咕剖崴嵝粤姿崦?Trap)為破骨細(xì)胞的標(biāo)志酶,特異地分布于破骨細(xì)胞中,為破骨細(xì)胞所*,通常作為鑒別破骨細(xì)胞的重要標(biāo)志物。
alp堿性磷酸酶染色服務(wù)技術(shù)介紹
堿性磷酸酶染色,又稱Alp染色,,是用于檢測骨細(xì)胞,、骨組織、腎,、肝堿性磷酸酶的染色方法,,使堿性磷酸酶呈黑色,細(xì)胞核呈淺藍(lán)色,,這是成熟成骨細(xì)胞的標(biāo)志性酶;也可用于肝炎和腎炎的檢測,。
堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)流程
(1)樣本接收:石蠟切片,、細(xì)胞爬片、冰凍切片
(2)實(shí)驗(yàn)步驟:脫蠟至水—染液配制-Alp染色-蘇木素淺染核
(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:染色好的玻片
alp堿性磷酸酶染色服務(wù)注意事項(xiàng)
1,、注意染液要現(xiàn)配現(xiàn)用,。
2、注意切片要用超純水水洗,。
TRAP染色是用于檢測骨組織,、骨細(xì)胞中特征物質(zhì)的染色,使破骨細(xì)胞呈紅色,背景呈綠色或藍(lán)色??咕剖崴嵝粤姿崦?Trap)為破骨細(xì)胞的標(biāo)志酶,特異地分布于破骨細(xì)胞中,為破骨細(xì)胞所*,通常作為鑒別破骨細(xì)胞的重要標(biāo)志物,。
TRAP染色服務(wù)內(nèi)容
1、石蠟切片4~5um,,脫蠟至水洗,;細(xì)胞爬片或者冰凍切片用80%酒精固定后蒸餾水水洗3次,每次3分鐘,。
2,、配制六偶氮副品紅溶液
3、配制孵育液:取1ml六偶氨副品紅加到18ml醋酸鹽溶中,,再加入1ml紫酚ASBI磷酸鹽溶液,,再加酒石酸鉀鈉 282mg。調(diào)pH值5.0,,過濾備用,;
4、陰性對照孵育液:取1ml六偶氨副品紅加到18ml醋酸鹽溶中,,再加酒石酸鉀鈉282mg,。調(diào)pH值5.0,過濾備用
5,、切片入37℃蒸餾水水洗30秒,;
6、入孵育液37℃孵育50-60分鐘,;
7,、去離子水水洗3分鐘;8,、入蘇木素復(fù)染40秒,;
9、自來水水洗10分鐘返藍(lán),;
10,、甘油明膠封片
alp堿性磷酸酶染色服務(wù)原理
人血液和造血細(xì)胞的堿性磷酸酶pH值為9.4,主要見于中性粒細(xì)胞系的成熟階段或晚幼粒細(xì)胞,。在不同生理狀態(tài)和病理狀態(tài)中均有明顯的改變,,具有鑒別診斷意義,。
方法
目前堿性磷酸酶染色法有改良Gomori法及偶氮偶聯(lián)法 (Kaplow)。
改良Gomori法原理為: 細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶水解試劑中的甘油磷酸鈉釋放出無機(jī)磷酸鹽,,與鈣離子作用生成磷酸鈣,,再與鈷離子作用生成磷酸鈷,后與硫化銨生成黑色硫化鈷顆粒,,沉淀于細(xì)胞漿中,。
偶氮偶聯(lián)法原理為:細(xì)胞中堿性磷酸酶在pH 9.5~9.8的緩沖液中,催化α-磷酸萘酚偶聯(lián)成不溶性有色偶氮染料沉淀于細(xì)胞漿中,。
結(jié)果解讀
ALP活性僅見于成熟或接近成熟的中性粒細(xì)胞,。計(jì)數(shù)100個中性粒細(xì)胞中陽性細(xì)胞數(shù),稱陽性率,。還可按陽性細(xì)胞中的顆粒密度分為1~5級,指數(shù)各為1~5,。計(jì)算100個中性粒細(xì)胞,,將每個細(xì)胞的指數(shù)相加,其總和稱陽性指數(shù)或積分,,作為判斷酶活性的半定量的指標(biāo),。由于方法及條件的不同,正常差別很大,,故每次檢查時應(yīng)作正常對照,。本法的正常值陽性率為60~99%,陽性指數(shù)169~367,,平均為274,。