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青島聚創(chuàng)美家環(huán)保技術(shù)有限公司
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微生物李斯特菌檢測板

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產(chǎn)品型號

品       牌聚創(chuàng)環(huán)保

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地青島市

更新時間:2019-01-10 10:21:23瀏覽次數(shù):1274次

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微生物李斯特菌檢測板檢測的李斯特菌包括單核細胞增生李斯特菌(Listeria.monocytogenes ),,英諾克李斯特菌(Listeria.innocua),,威氏李斯特菌(Listeria.welshi),但不能區(qū)分各種菌,。

一,、微生物李斯特菌檢測板產(chǎn)品介紹
1、微生物李斯特菌檢測板原理及適用范圍
李斯特菌檢測板是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,,含有標(biāo)準(zhǔn)的營養(yǎng)培養(yǎng)基,選擇性試劑,,冷水可溶性吸水凝膠和β-D-葡萄糖苷酶(β-D-glucosidase)的顯色底物( X-GLU ),,適用于檢測或者計數(shù)食品及環(huán)境樣品中的李斯特菌菌數(shù)。李斯特菌檢測板檢測的李斯特菌包括單核細胞增生李斯特菌(Listeria.monocytogenes ),,英諾克李斯特菌(Listeria.innocua),,威氏李斯特菌(Listeria.welshi),但不能區(qū)分各種菌,。 
2,、操作方法
2.1 食品樣品檢測
2.1.1 食品樣品處理:取樣品25 g(mL)放入裝有225 mL滅菌磷酸鹽緩沖液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)袋內(nèi),,制成1:10的樣品勻液。根據(jù)樣品污染程度及檢驗需要,,可進一步制成10倍遞增的樣品稀釋液,,選擇2~3 個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)來進行接種。 
2.2 環(huán)境樣品檢測
2.2.1 環(huán)境樣品采集:用無菌的涂抹棒或其他采樣設(shè)備收集環(huán)境樣品,。濕潤采樣設(shè)備液體體積≤10 mL,。濕潤劑可以為無菌水,滅菌生理鹽水(磷酸鹽緩沖液)或者緩沖蛋白胨水,。
2.2.2 環(huán)境樣品處理:在收集的環(huán)境樣品中添加10 mL 滅菌生理鹽水(或磷酸鹽緩沖液),,充分混勻。根據(jù)樣品污染程度及檢驗需要,,可進一步制成10倍遞增的樣品稀釋液,,選擇2~3 個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)來進行接種。 
2.3 接種:將李斯特菌檢測板上層膜不干膠標(biāo)簽部分揭開,,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液均勻滴加到紙片上,,迅速貼好上層膜并水平晃動檢測板,靜置10 s左右,,待樣品勻液被吸附在濾紙上,。每個稀釋度接種兩個檢測板作為重復(fù)。
2.4 培養(yǎng):將檢測板疊在一起,,倒置于36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),,培養(yǎng)18~24h。
3,、結(jié)果判讀
在檢測板上生長的藍綠色點即為李斯特菌陽性點,,若檢測板上無菌生長或者長出點為其他顏色點即為李斯特菌陰性。

                 

4,、計數(shù)原則及報告方式
4.1 樣品計數(shù)
4.1.1 以生長有30~300CFU的檢測板為計數(shù)適宜范圍,。
4.1.2 若只有一個稀釋度檢測板上的菌落數(shù)在計數(shù)合適范圍30~300CFU之間,則計算兩個檢測板菌落數(shù)的平均值,,再除以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),,作為每克(毫升)中菌落總數(shù)結(jié)果。
4.1.3 若有兩個連續(xù)稀釋度在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時,,按式(1)計算:
                       ∑C
               N= ————————       •••••••••••••••••••(1) 
                   (n1+0.1n2)d
式中:
N——樣品中李斯特菌菌落數(shù),;
∑C——兩個連續(xù)稀釋度檢測板(含適宜范圍菌落數(shù)的檢測板)李斯特菌落數(shù)之和;
n1——適宜范圍菌落數(shù)的*個稀釋度(低)檢測板個數(shù),;
n2——適宜范圍菌落數(shù)的第二個稀釋度(高)檢測板個數(shù),;
d——*稀釋度的稀釋倍數(shù)
 示例:

稀釋度

1:10(*個稀釋度)

1:100(第二個稀釋度)

菌落數(shù)

245,247

31,30


               (245+247+31+30)
               N= ————————  =2514
                  (2+0.1×2)×10-1
結(jié)果表述為2.5×103CFU/g(mL),。
4.1.4 若所有稀釋度檢測板上均無菌落生長,,則以小于1/d(d—*低稀釋倍數(shù))計算。
4.1.5 低數(shù)值的估算:如果實驗樣品原液(水及液體飲料)或初始稀釋懸液(其他樣品)的兩個檢測板上的菌落數(shù)均小于30CFU,,計算兩個檢測板上的菌落數(shù)的平均數(shù),。計算式(2):
                            ∑C
                  NE = ——    •••••••••••••••••••(2)
                            nd
式中:
NE——每毫升或每克樣品中菌數(shù)的估算值;
∑C——兩個檢測板上菌落數(shù)的和,;
n——檢測板的數(shù)量,;
d——樣品初始懸液或?qū)嶋H接種懸液的稀釋倍數(shù)。
4.1.6 大數(shù)值的估算:若所有稀釋度的檢測板上菌落數(shù)均大于300CFU,,計數(shù)接近300CFU的檢測板上的菌落并計算出平均數(shù),,其他檢測板可記錄為多不可計。結(jié)果計算式(3):
                           ∑C
                  NE = ——   •••••••••••••••••••(3)
                           nd
式中:
NE——每毫升或每克樣品中菌數(shù)的估算值,;
∑C——兩個檢測板上菌落數(shù)之和,;
n——檢測板的數(shù)量;
d——與樣品懸液相*的稀釋倍數(shù),。
5,、結(jié)果報告
固體樣品以CFU/g為單位報告,液體樣品以CFU/mL為單位報告,。
6,、附加說明
注意使用過的檢測板上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理,。

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