詳細介紹
孔雀石綠ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法,,在酶標板微孔條上預包被孔雀石綠抗原,樣品殘留的孔雀石綠和微孔條上預包被的抗原共同競爭抗孔雀石綠抗體,,加入酶標二抗后,,經(jīng)TB底物顯色,,樣品吸光度值與其殘留物孔雀石綠呈負相關,,與標準出線比較再乘以其對應的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中孔雀石綠的含量,。
一,、產(chǎn)品規(guī)格參數(shù):
名稱:孔雀石綠ELISA檢測試劑盒
規(guī)格:48T/96T
檢測方法:ELISA方法
檢測波長:450/630nm
品牌:臻科生物
適用范圍:僅供科研
檢測樣本種類:肌肉和肝臟組織、尿樣,、血清,、飼料、動物組織,、水產(chǎn),、蜂蜜、牛奶等,。
貯藏:試劑盒于2-8℃保存,,避免冷凍。
保質(zhì)期:該產(chǎn)品有效期為1年,,生產(chǎn)日期見包裝盒,。
二、檢測步驟:
測定前應須知:
1,、使用之前將所有試劑和需用板條的溫度回升至室溫(20一25℃),。
2、使用之后立即將所有試劑放回28℃,。
3,、在LISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性,,正確的洗板操作是LISA測定程序中的要點,。
4、在所有恒溫孵育過程中,,避免光線照射,,用蓋板膜封住微孔板,。
具體操作:
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,,置于室溫(20~25℃)平衡30min以上,,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2,、取出需要數(shù)量的微孔板,,將不用的微孔放入白封袋,保存于28℃,。
3,、洗滌作液在使用前也需回溫。
4,、編號:將樣品和標準品對應微孔按序編號,,每個樣品和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣品孔所在的位置,。
5,、加標準品/樣品:加標準品/樣品5041/孔到對應的微孔中,然后加入抗試劑5041/孔,,輕輕振蕩混,,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應30mn。
6,、洗板:小心揭開蓋板膜,,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌工作液250μ1/孔,,充分洗滌45次,,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。
7,、加酶標物:加入酶標物100μ1/孔,,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應30min,取出重復洗板步驟6,。
8,、顯色:加入底物液A液50μ1/孔,再加底物液B液50μ1/孔,,輕輕振蕩混勻,,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應15~20min。
9,、測定:加入終止液50μ1/孔,,輕輕振蕩混勻,設定酶標儀于450m處(建議用雙波長450/630m檢測,,請在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),,測定每孔0D值,。(若無酶標儀,則不加終止液用日測法可進行判定),。
三,、注意事項:
1、室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫(25℃)會導致所有標準的OD值偏低,。
2,、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,,重復性不好的現(xiàn)象,。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3,、混合要均勻,,洗板要*,在ELISA分析中的再現(xiàn)性,,很大程度上取決于洗板的一致性,。
4,、在所有孵育過程中,,用蓋板膜封住微孔板,避免光線照射,。
5,、不要使用過了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑,。
6,、顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應當棄之,。0標準的吸光度值小于0.5個單位(A450nm< 0.5 )時,,表示試劑可能變質(zhì)。
7,、反應終止液有腐蝕性,,避免接觸皮膚。
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