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詳細介紹
豬前脂肪原代細胞
豬前脂肪細胞分離自脂肪組織,；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結締組織分隔成小葉,；貯存的脂肪,，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用,。它們影響胰島素敏感性,、血壓水平、內皮功能,、纖溶活動及炎癥反應,，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內分泌系統(tǒng),。脂肪組織在體內含有兩種主要的細胞：一種是在胞漿內積聚脂滴的成熟脂肪細胞；另一種是雖未在胞漿內積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細胞,。前脂肪細胞呈梭形,，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪細胞呈圓形,，已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力,。由于前脂肪細胞是一類具有增殖和向脂肪細胞分化能力的特異化前體細胞，與肥胖有著非常密切的關系,。前脂肪細胞是一種類成纖維細胞,，在演變的過程中不斷吸收脂質，終成為成熟的脂肪細胞,。前脂肪細胞對外界機械損傷的抵抗力較強,，可望成為軟組織缺損的有益填充物。
英文名稱 | Porcine Preadipocyte Cells | 組織來源 | 脂肪組織 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7013 |
細胞形態(tài) | 梭形,、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：豬前脂肪細胞
組織來源：脂肪組織
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
方法簡介
公司實驗室分離的豬前脂肪采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
公司實驗室分離的豬前脂肪經(jīng)油紅O染色檢測,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
人羊膜細胞;WISH | 異戊烯焦酸1抗體 |
蛋白酸酶2Cα抗體 | 酸化蛋白精N甲基4抗體 |
內皮素1抗體 | 候選腫瘤抑制基因MARVELD1抗體 |
降鈣素受體抗體 | 脫氧輔合酶蛋白抗體 |
9號染色體開放閱讀框57抗體 | 微絲相關蛋白hHBrk1抗體 |
LSAMP Others Human 人 LSAMP 人細胞裂解液 (陽性對照) | EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYM 人真皮微血管內皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
卵巢上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | CNDP2 Others Human 人 CNDP2 / CPGL / PEPA 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CLMP Others Human 人 ASAM 人細胞裂解液 (陽性對照) | CD3D Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3d / CD3 delta 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SiHa(人子宮頸鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細胞裂解液 (陽性對照) | HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CL-0419QSG-7701(人正常肝細胞)5×106cells/瓶×2 | 豬前脂肪原代細胞候選腫瘤抑制基因MARVELD1抗體 |
TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細胞裂解液 (陽性對照) | HT-29(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞;ERA-2 | MMP7 Others Human 人 MMP7 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Malmc細胞，人皮膚纖維微細胞系 光滑念珠菌 雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3 | 5號染色體開放閱讀框33抗體 |
病樣蛋白1抗體 | CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
自噬相關蛋白13抗體 | 乙?；D移酶10抗體 |
B淋巴細胞生發(fā)中心相關蛋白抗體 | LSAMP Others Human 人 LSAMP 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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