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  elisa試劑盒運(yùn)用前,，將一切試劑充沛混勻,。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,，避免加樣時(shí)參加很多的氣泡,，發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
     ELISA試劑盒依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù),。每個(gè)規(guī)范品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品依據(jù)自己的數(shù)量來定，ELISA試劑盒能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。

參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反應(yīng)孔,、參加待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板,，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育1小時(shí),。

甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒,，甩去洗刷液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。ELISA試劑盒假如用洗板機(jī)洗刷,，洗刷次數(shù)添加一次。

每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,，悄悄振動(dòng)混勻,，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗刷液,，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次,。

ELISA試劑盒每孔參加底物A,、B各50ul，ELISA試劑盒悄悄振動(dòng)混勻,，37℃溫育10分鐘,，避免光照。