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  elisa試劑盒運用前,，將一切試劑充沛混勻,。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，避免加樣時參加很多的氣泡,，發(fā)生加樣上的差錯,。
     ELISA試劑盒依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品依據(jù)自己的數(shù)量來定,，ELISA試劑盒能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反應(yīng)孔,、參加待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,，悄悄振動混勻,，37℃溫育1小時。

甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗刷液,，振動30秒，甩去洗刷液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。ELISA試劑盒假如用洗板機洗刷,，洗刷次數(shù)添加一次,。

每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動混勻,，37℃溫育30分鐘,。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液,，振動30秒,，甩去洗刷液，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。假如用洗板機洗刷，洗刷次數(shù)添加一次,。

ELISA試劑盒每孔參加底物A,、B各50ul，ELISA試劑盒悄悄振動混勻,，37℃溫育10分鐘,，避免光照。