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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠棕色脂肪干采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠棕色脂肪干經(jīng)CD29,、CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠棕色脂肪干原代細(xì)胞 | 組織來源 | 脂肪組織 |
英文名稱 | Mouse Brown Adipose Stem Cells | 貨號 | YS-01X7664 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介：
小鼠棕色脂肪干細(xì)胞分離自棕色脂肪組織,；動(dòng)物體內(nèi)存在棕色和白色兩種脂肪,，白色脂肪堆積在皮下，負(fù)責(zé)儲存多余熱量,；棕色脂肪負(fù)責(zé)分解引發(fā)肥胖的白色脂肪,，將后者轉(zhuǎn)化成二氧化碳、水和熱量,，本身不儲存熱量,。棕色脂肪組織呈棕色，其特點(diǎn)是組織中有豐富的毛細(xì)血管,，脂肪細(xì)胞內(nèi)散著許多小脂滴,，線粒體大而豐富，核圓形,，位于細(xì)胞中央,，這種脂肪細(xì)胞也稱為多泡脂肪細(xì)胞。棕色脂肪組織在成年動(dòng)物極少,，新生兒及冬眠動(dòng)物較多,，在新生兒主要分布在肩胛間區(qū)、腋窩及頸后部等處,。棕色脂肪組織僅在嬰兒時(shí)期發(fā)揮作用,，它們堆積在新生兒肩胛處，幫助維持體溫,。隨著年齡增長,，棕色脂肪會逐漸消失。終,，動(dòng)物體內(nèi)只殘存少量棕色脂肪細(xì)胞,，分布于頸部和鎖骨。脂肪干細(xì)胞（ADSCs）是一種具有多向分化潛能的干細(xì)胞,，主要恢復(fù)組織細(xì)胞的修復(fù)功能,，促進(jìn)細(xì)胞的再生，恢復(fù)年輕面容的同時(shí),，身體機(jī)能也得到充分改善,，有效改善亞健康、早衰等疾病,，由內(nèi)而外真正的有效抵抗衰老,。脂肪干細(xì)胞具有很多優(yōu)點(diǎn)：①具有自我更新及多向分化的潛能,；②來源充足；③對供區(qū)的創(chuàng)傷較??；④獲得率及體外擴(kuò)增速率高。脂肪干細(xì)胞是目前被廣泛應(yīng)用于組織工程領(lǐng)域中理想的種子細(xì)胞,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
C127細(xì)胞,，小鼠細(xì)胞 Y1(腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞) 人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5 | 核糖體蛋白L15抗體 |
WD重復(fù)膜蛋白19抗體 | 細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白20抗體 |
泌乳升高蛋白1抗體 | 凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端） |
上腺皮質(zhì)發(fā)育異常同源蛋白抗體 | 驅(qū)動(dòng)蛋白2抗體 |
血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗體 | 鉀離子通道蛋白家族成員1抗體 |
CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標(biāo)簽) | 腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
CA46細(xì)胞，人Butts淋巴瘤細(xì)胞系 小鼠Lewis肺癌瘤株,LLT細(xì)胞 人肝臟星形細(xì)胞裂解物HHSteCL | NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人食道上皮細(xì)胞RNAHEEpiC miRNA5 μg | 人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5537LC |
人子宮平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CL-0305SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2 前列腺癌細(xì)胞,，22RV1細(xì)胞 MDCK superdome細(xì)胞,，狗腎細(xì)胞隆突型 | 小鼠棕色脂肪干原代細(xì)胞凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端） |
猴源細(xì)胞 | CHL/IU[CHL-11]細(xì)胞，中國倉鼠肺細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,PANC-1細(xì)胞 CM-R085大鼠表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IAR20(大鼠肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
CM-R118大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體 |
鈣依賴分泌激活蛋白1抗體 | 人小膠質(zhì)細(xì)胞RNAHM miRNA5 μg |
原始廣泛存在蛋白1抗體 | 丙型肝炎病毒NS5B抗體 |
類狀瘤病毒31 E7抗體 | CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標(biāo)簽) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán),。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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