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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠子宮頸上皮采用膠原酶消化法,，結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠子宮頸上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠子宮頸上皮原代細(xì)胞 | 組織來源 | 子宮組織 |
英文名稱 | Mouse Cervical Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7202 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細(xì)胞簡介：
小鼠子宮頸上皮細(xì)胞分離自子宮頸組織；子宮頸位于子宮下部,，近似圓錐體,，上端與子宮體相連，下端深入陰道,。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分：宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部,，在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部。宮頸的中央為前后略扁的長梭性管腔,，其上端通過宮頸內(nèi)口與子宮腔相連,，其下端通過宮頸外口開口于陰道。內(nèi)外口之間即宮頸管,。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化,；宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成,。子宮頸可有多種疾病,，包括胚胎發(fā)育異常、炎癥,、瘤樣病變,、良性腫瘤、惡性腫瘤,、損傷,、宮頸性不孕、輔助生育技術(shù)、宮頸與性,、宮頸妊娠等許多問題,，體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
LS174T細(xì)胞,，人結(jié)腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,SK37細(xì)胞 人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2 | 核糖體RNA合成蛋白42抗體 |
v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體 | 細(xì)胞維甲酸結(jié)合蛋白2抗體 |
梅克爾憩室綜合征相關(guān)蛋白5抗體 | 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體 |
母細(xì)胞瘤X蛋白抗體 | 慶大單克隆抗體 |
血管緊張素III抗體 | 鉀離子通道蛋白EAG1抗體 |
HCT 116(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 腎小球內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
草魚肝臟細(xì)胞;L8824 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤，WERI-Rb-1細(xì)胞 KB(口腔表皮樣癌細(xì)胞) | 人腦瘤細(xì)胞;SF767 |
人肺動脈成纖維細(xì)胞RNAHPAF miRNA5 μg | 人胚肺細(xì)胞系;KuMA |
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B | 人腦血管平滑肌細(xì)胞總RNAHBVSMC tDNA |
兔晶體上皮細(xì)胞永生系;N/N1003A(RLE) 結(jié)腸癌細(xì)胞,，HCT 116細(xì)胞 M-1細(xì)胞,，小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化) | 小鼠子宮頸上皮原代細(xì)胞淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體 |
CL-0205Sf-9(昆蟲細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | CD38 Others Mouse 小鼠 CD38 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CM-R045大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 | 調(diào)亡誘導(dǎo)因子家族蛋白PEF1抗體 |
鈣調(diào)素調(diào)節(jié)蛋白相關(guān)蛋白抗體 | CL-0465WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
原鈣粘附蛋白α9抗體 | 丙型肝炎病毒-NS3抗體 |
類狀瘤病毒16抗體 | HCT 116(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán),。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
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