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詳細介紹
小鼠羊膜間充質干原代細胞
小鼠羊膜間充質干細胞分離自胎盤羊膜組織,；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官,，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發(fā)育,，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),，而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素,，是一個重要的內分泌器官,。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結合,，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤,。羊膜是胎盤的內層,，與眼結膜組織結構相似，含有眼表上皮細胞,，包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質,，其光滑，無血管,、及淋巴,，具有一定的彈性；在電鏡下,，其分為五層：上皮層,、基底膜、致密層,、纖維母細胞層和海綿層,，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ,、Ⅲ,、Ⅳ、Ⅴ,、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白,、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成,，均具有多分化潛能,，可轉化為元，且還有合成,、釋放生物活性物質和營養(yǎng)因子的功能,。
英文名稱 | Mouse Amniotic Mesenchymal Stem Cells | 組織來源 | 羊膜 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X8542 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：小鼠羊膜間充質干細胞
組織來源：羊膜
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
小鼠羊膜間充質干細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的小鼠羊膜間充質干采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的小鼠羊膜間充質干經CD44免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
人真皮淋巴內皮細胞總RNAHDLEC NA | 單酸脫氫酶1抗體 |
酸脫氫酶激酶亞型2抗體 | CD33抗體 |
Ephrin B抗體 | 絲/蘇蛋白激酶MARK2抗體 |
補體C3a過敏毒素抗體 | S期激酶活化蛋白DBF4A抗體 |
酸化細胞表面趨化因子受體4抗體 | 甲型肝炎病毒聚蛋白VP1抗體 |
小鼠海馬趾星形膠質細胞(MA-h)(5×105) | 人纖維肉瘤細胞;HT-1080 大鼠腸平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL |
腦靜脈血管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | PDGFRB Others Cynomolgus 食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細胞裂解液 (陽性對照) | SUSD4 Others Human 人 SUSD4 / Sushi domain-coaining 人細胞裂解液 (陽性對照) |
ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照) | HA Others H5N2 甲型流感 H5N2 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-H004人肺大靜脈內皮細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠羊膜間充質干原代細胞絲/蘇蛋白激酶MARK2抗體 |
NHEM.f-c M2 正常人表皮黑素細胞(NHEM)少年，M2培養(yǎng)液中培養(yǎng) 500,000cells 視網膜微血管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人主動脈內皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
小鼠腎集合管細胞(SV40轉化);M-1 | Hela-Luc (穩(wěn)定株)人細胞 Hela-Luc (stable sain) in human cervical cancer cells DMEM+10% FBS+200ug/ml Zeocin |
EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細胞裂解液 (陽性對照) | 細胞粘附分子CALL抗體 |
20號染色體開放閱讀框19抗體 | NAALADL1 Others Human 人 NAALADL1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
整合素樣金屬蛋白酶與2型抗體 | 鉀離子轉運蛋白1抗體 |
生長休止特定蛋白1抗體 | 小鼠海馬趾星形膠質細胞(MA-h)(5×105) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數,。
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