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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
細(xì)胞屬性：
英文名稱 | 詳見說明 | 組織來源 | 詳見說明 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | X0003 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
組織來源：詳見說明
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán),。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品：
大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J 大細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H460[H460]細(xì)胞 VX2細(xì)胞,，兔的肝細(xì)胞 | 核纖層蛋白A抗體 |
X射修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白4抗體 | 細(xì)胞粘附分子3抗體 |
免疫球蛋白超家族成員16抗體 | 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體（短型） |
臟和腦蛋白抗體 | 趨化素樣蛋白抗體 |
血管生成素2抗體 | 鉀通道相互作用蛋白3抗體 |
kasumi-1, 人白血病細(xì)胞株 Human | 大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
GP-293人胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line GP-293 DMEM+10% FBS | IFNA13 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
人雪旺細(xì)胞RNAHSC miRNA5 μg | 貓?jiān)醇?xì)胞 |
非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgR;VERO/IgR | CL-0316A7r5(大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
786-0細(xì)胞,，腎透明細(xì)胞腺癌 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞,95-D細(xì)胞 EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 | 人原代細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體（短型） |
黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2 | L1細(xì)胞，卵巢癌細(xì)胞 急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞),Jurkat細(xì)胞 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞;SK-MEL-1 |
Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌耐藥細(xì)胞株 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1022 | IL12B Protein Human 重組人 IL12B / P40 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
CL-0262BE(2)-M17(人母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 同源盒蛋白B2抗體 |
鈣整合素結(jié)合蛋白1抗體 | 人小梁網(wǎng)細(xì)胞裂解物HTMCL |
載脂蛋白A1抗體 | 補(bǔ)體C1r鏈多肽抗體 |
離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白SLC7A9抗體 | kasumi-1, 人白血病細(xì)胞株 Human |
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