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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙胚采用膠原酶消化法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙胚經(jīng)檢測,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠牙胚原代細(xì)胞 | 組織來源 | 牙胚 |
英文名稱 | Mouse Tooth Germ Cells | 貨號 | YS-01X8540 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介：
小鼠牙胚細(xì)胞分離自牙胚組織,；牙胚是牙齒開始發(fā)育階段的形態(tài),，是由牙板向深層的結(jié)締組織內(nèi)伸延，在其末端細(xì)胞增生,，進(jìn)一步發(fā)育成牙胚,。牙胚有三部分組成：①成釉器（enamel organ），起源于口腔外胚層,，形成釉質(zhì),；②牙乳頭（dental papilla），起源于外胚層間充質(zhì),，形成牙髓和牙本質(zhì),；③牙囊（dental sac），起源于外胚層間充質(zhì),，形成牙骨質(zhì),、牙周膜和固有牙槽骨。牙胚的發(fā)生是口腔上皮和外胚間充質(zhì)相互作用的結(jié)果,。在胚胎的第5周,，覆蓋在原口腔的上皮由兩層細(xì)胞組成，外層是扁平上皮細(xì)胞,，內(nèi)層為矮柱狀的基底細(xì)胞,。在未來的牙槽突區(qū)，深層的外胚層間充組織誘導(dǎo)上皮增生,，開始僅在上下頜弓的特定點(diǎn)上,，上皮局部增生,，很快增厚的上皮相互連接，依照頜骨的外形形成一馬蹄形上皮帶,，稱為原發(fā)性上皮帶,。在胚胎的第7周，這一上皮帶繼續(xù)向深層生長,，并分裂為兩個：向頰（唇）方向生長的上皮板稱前庭板,，位于舌（腭）側(cè)的上皮板稱為牙板（dental lamina）。在胚胎的第8-10周,，前庭板繼續(xù)向深層生長,，與發(fā)育的牙槽嵴分開，前庭板表面上皮變性,，形成口腔前庭溝,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形,、多角形
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
小鼠牙胚細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞RNAHDMEC miRNA5 μg | 酸化整合素連接激酶1抗體 |
酸化蛋白激酶A受體2α亞基抗體 | 鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體 |
雌激素硫酸轉(zhuǎn)移酶抗體 | 卡波西氏肉瘤皰疹潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 |
1號染色體開放閱讀框229抗體 | 表皮源性蛋白6抗體 |
尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子4抗體 | 三甲基化組蛋白H3抗體 |
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | HPF-c 人類肺成纖維細(xì)胞(HPF) 500,000cells 腮腺細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | CSNK2A1 Others Human 人 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
GP140 Others HIV 人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | TMUB2 Others Human 人 TMUB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人膀胱上皮永生化細(xì)胞;SV-HUC-1 人主動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | LTF Others Mouse 小鼠 Lactoansferrin / LTF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CM-H012人支氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠牙胚原代細(xì)胞卡波西氏肉瘤皰疹潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 |
LRG1 Others Human 人 LRG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 Mouse |
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30 | A172(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H107人軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1 |
CL-0062CHO-K1(倉鼠卵巢細(xì)胞亞株)5×106cells/瓶×2 | 接觸蛋白相關(guān)蛋白3抗體 |
鉀離子通道蛋白家族成員2抗體 | 人表皮黑色素細(xì)胞-深色素(HEM)( 5×105 ) |
血管生成素樣蛋白4抗體 | NOMO蛋白抗體 |
高爾基體外周膜蛋白p65抗體 | PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán),。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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