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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠心臟微血管周采用膠原酶消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠心臟微血管周經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠心臟微血管周原代細胞 | 組織來源 | 心臟組織 |
英文名稱 | Mouse Cardiac Microvascular Pericyte Cells | 貨號 | YS-01X7644 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠心臟微血管周細胞分離自心臟組織,；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力,，把血液運行至身體各個部分,。心臟由心肌構成，左心房,、左心室,、右心房,、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,，故互不相通,，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,，而不能倒流,。心臟的作用是推動血液流動，向器官,、組織提供充足的血流量,，以氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳,、無機鹽,、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能,。心臟微血管內(nèi)皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用,，在心臟血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明,，心肌微血管周細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能,，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
人整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100] | 酸化胰島素受體β抗體 |
酸脂酸水解酶1抗體 | CD318抗體 |
雌激素受體α抗體（用于western blot） | MSH同源蛋白1樣蛋白抗體 |
1號染色體開放閱讀框33抗體 | 二氫還原酶抗體 |
軟骨蛋白1抗體 | 三羥基三甲基A合成酶1 |
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照) | JAM3 Others Mouse 小鼠 JAM3 / JAM-C 人細胞裂解液 (陽性對照) |
腦微血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | FGFR4 Others Rat 大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
IL2RB Others Human 人 IL2Rβ 人細胞裂解液 (陽性對照) | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人細胞裂解液 (陽性對照) | HBdMEC Pellet 人膀胱微血管內(nèi)皮細胞團塊 > 1 mio.cells /EDTA消化液T/E |
CM-H020人胰島β細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠心臟微血管周原代細胞MSH同源蛋白1樣蛋白抗體 |
IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 6-77) 人細胞裂解液 (陽性對照) | 中國倉鼠卵巢細胞-二氫還原酶缺陷型;CHO/dhFr- |
小鼠腎足細胞;Mouse podocyte | NCI-H1869[H1869]細胞，人肺癌細胞 人膀胱癌細胞,BIU-87細胞 人肝臟間充質(zhì)干細胞HMSC-hp |
S100A4 Others Mouse 小鼠 S100A4 人細胞裂解液 (陽性對照) | 6號染色體開放閱讀框150抗體 |
Ras信號轉(zhuǎn)導KSR1蛋白抗體 | EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族9抗體 | 酸化離子/氫離子交換蛋白3抗體 |
膠質(zhì)細胞系源性營養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體 | LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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