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小鼠心臟微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自心臟組織,；心臟是脊椎動(dòng)物身體中重要的一個(gè)器官,，主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力,，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分,。心臟由心肌構(gòu)成,，左心房、左心室,、右心房,、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,，故互不相通,，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣）,，這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流,。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng),，向器官、組織提供充足的血流量,，以氧和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無(wú)機(jī)鹽,、尿素和尿酸等）,，使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力,、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,，在心臟血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義,。近年來(lái)大量研究表明，心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能和病理改變直接影響心肌細(xì)胞功能,，也是諸多毒素,、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細(xì)胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機(jī)制和細(xì)胞間旁分泌細(xì)胞生長(zhǎng)因子研究中起著重要作用,。
英文名稱 | Mouse Cardiac Microvascular Endothelial Cells | 組織來(lái)源 | 心臟組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7410 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源：心臟組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠心臟微血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠心臟微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
P3-X63-Ag8細(xì)胞,，骨髓瘤細(xì)胞 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞,A3細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0909 | 核仁酸蛋白抗體 |
TWIK相關(guān)酸敏感鉀離子通道蛋白9抗體 | 細(xì)胞色素氧化酶裝配因子PET112抗體 |
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 | 單克隆抗體 |
元電壓門控通道蛋白β2/Na+ CP type IIβ抗體 | 橋粒芯糖蛋白1 |
嗅覺(jué)相關(guān)蛋白STOML3抗體 | 甲型肝炎病毒聚蛋白VP1抗體 |
5637(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16 |
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA 肝癌細(xì)胞,，Hepa 1-6細(xì)胞 M145細(xì)胞，猴腎C細(xì)胞 | 人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17 |
真皮淋巴上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-2 |
CL-0327Calu-6(人肺退行性癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | CL-0286M1(小鼠白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
293sars181A細(xì)胞,，Sars蛋白表達(dá)株 人細(xì)胞,HBL-100細(xì)胞 腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基MCM-prf | 小鼠心臟微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞單克隆抗體 |
恒河猴腎細(xì)胞;RM-1 | NCI-H460[H460]細(xì)胞,，大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,H4細(xì)胞 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32 |
TNFRSF17 Others Mouse 小鼠 BCMA / TNFRSF17 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7) |
腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)亮拉鏈蛋白抗體 |
鈣結(jié)合蛋白D28K抗體 | 人無(wú)色素睫狀上皮細(xì)胞HNPCEpiC |
原鈣粘蛋白γA8抗體 | 表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白1抗體 |
酪蛋白硫酸轉(zhuǎn)移酶1抗體 | 5637(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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