化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
小鼠小氣道上皮原代細(xì)胞
小鼠小氣道上皮細(xì)胞分離自小氣道；臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細(xì)支氣管稱為小氣道,。小氣道具有氣流阻力小，但易阻塞的特點(diǎn)。在平靜吸氣時,，空氣進(jìn)入狹窄的鼻咽部，產(chǎn)生渦流,。由于小氣道已無軟骨支持,，在脫離纖維鞘嵌入肺組織后，管腔通暢性不象軟骨性氣道，易于受胸腔的壓力變化的影響,。小氣道上皮細(xì)胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層,，作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處,，這些細(xì)胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應(yīng),、產(chǎn)生化學(xué)因子進(jìn)行宿主防御、表達(dá)粘附分子,，并可能通過HLA-DR表達(dá)呈遞抗原,；它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病,，如哮喘,、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化,，都涉及呼吸道表面上皮細(xì)胞的破壞,；小氣道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴(kuò)增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道的生理功能特點(diǎn)：①小氣道阻力??；②氣流速度慢；③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例,。
英文名稱 | Mouse Small Airway Epithelial Cells | 組織來源 | 小氣道 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8538 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠小氣道上皮細(xì)胞
組織來源：小氣道
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
小鼠小氣道上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠小氣道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠小氣道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
RBE, 人肝膽管癌細(xì)胞 | 核仁蛋白NAP57抗體 |
TUB蛋白抗體 | 嘧啶P450Ⅱj3抗體 |
錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 | 抵抗素抗體 |
元蛋白22抗體 | 橋粒相關(guān)蛋白DRS抗體 |
修補(bǔ)相關(guān)蛋白PTCHD3抗體 | 硝唑單克隆抗體 |
HUVEC, 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | CSSTSP1 中華鱉脾來源細(xì)胞 |
CM-M124小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 293A，人胚腎上皮細(xì)胞系(腺病毒包裝級別) |
支氣管成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人腎癌Wilms細(xì)胞;G401 |
NCI-H292 人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移) | Asp2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞;FC33 |
恒河猴腎細(xì)胞;RM-1 人胰腺癌細(xì)胞,，HPAC細(xì)胞 SGC-7901(胃腺癌細(xì)胞) | 小鼠小氣道上皮原代細(xì)胞抵抗素抗體 |
人癌細(xì)胞;MCF 7B | CHODL Others Rat 大鼠 CHODL / CHOndrolectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CMVECs微血管內(nèi)皮細(xì)胞 CMVECs micro vascular endothelial cells DMEM+10%FBS | 小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
豹貓肌肉成纖維樣細(xì)胞;LCM4 | 糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體 |
鈣結(jié)合蛋白5/3抗體 | MiaPaCa-2, 人胰腺癌細(xì)胞 Human |
原鈣粘蛋白γA5抗體 | 表皮生長因子受體底物8抗體 |
酪蛋白激酶δ1抗體 | HUVEC, 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
化工儀器網(wǎng)