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詳細介紹
小鼠小腸隱窩上皮原代細胞
小鼠小腸隱窩上皮細胞分離自小腸組織,；小腸位于腹中,，上端接幽門與胃相通,，下端通過闌門與大腸相連,，是食物消化吸收的主要場所,。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門，下接盲腸,，分為十二指腸,、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關重要的,，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液,、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,，基本上完成了消化過程,，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜,、粘膜下層,、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環(huán)形皺襞,，粘膜有許多絨毛,，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺,，其開口位于絨毛根部之間,。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切；構成腸腺的細胞有柱狀細胞,、杯狀細胞,、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似,，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣,。小腸有三種功能即消化,、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主,。小腸腔面的環(huán)行皺襞從幽門附近開始出現(xiàn),，在十二指腸末段和空腸頭段極發(fā)達，向下逐漸減少和變矮,，至腸中段以下基本消失,。粘膜表面還有許多細小的腸絨毛，是由上皮和固有層向腸腔突起而成,，形狀不一,，以十二指腸和空腸頭段發(fā)達。絨毛于十二指腸呈葉狀,，于空腸呈指狀,，于回腸則細而短。環(huán)行皺襞和絨毛使小腸表面積擴大20-30倍，絨毛根部的上皮下隱至固有層形成管狀的小腸腺,，又稱腸隱窩,，故小腸腺與絨毛的上皮是連續(xù)的，小腸腺直接開口于腸腔,。
英文名稱 | Mouse Small Intestine Crypt Epithelial Cells | 組織來源 | 小腸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7150 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠小腸隱窩上皮細胞
組織來源：小腸組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠小腸隱窩上皮采用先機械分離法,、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠小腸隱窩上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;M619 大鼠胎兒真皮成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | 核仁蛋白8抗體 |
TTC33蛋白抗體 | 嘧啶P4504A22抗體（脂肪酸Ω羥化酶） |
錨蛋白重復及SAM結構域蛋白1A抗體 | 低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體 |
元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關蛋白抗體 | 橋粒糖蛋白1抗體 |
雄激素調(diào)節(jié)樣蛋白抗體 | 甲胎蛋白抗體 |
H-4-II-E 大鼠肝細胞瘤細胞 | 小鼠單核巨噬細胞;J774A.1 |
973細胞,，人肺癌細胞 小鼠成骨細胞系,MC3T3-E1細胞 CL-0138Lec1(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2 | THP-1(人髓系白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2 |
支氣管成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | NCI-H157(人非小細胞肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
CL-0325C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細胞)5×106cells/瓶×2 | 人小梁網(wǎng)細胞cDNAHTMC cDNA |
Daudi細胞,，人白血病細胞 小鼠腎足細胞,Mouse podocyte細胞 骨骼肌細胞培養(yǎng)基SkMCM-prf | 小鼠小腸隱窩上皮原代細胞低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體 |
CL-0241VCaP(人前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 | COLO 201(人結直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
XCL1 Others Human 人 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | CM-R025大鼠外周血白細胞培養(yǎng)基100mL |
VEGFC Protein Human 重組人 VEGF-C 蛋白 (His 標簽) | 糖皮質(zhì)激素受體β抗體 |
鈣結合蛋白1抗體 | 正常大鼠腎細胞;NRK |
原鈣粘蛋白γA3抗體 | 表皮生長因子受體III型突變體抗體 |
酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗體 | H-4-II-E 大鼠肝細胞瘤細胞 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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