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小鼠小腸Cajal間質(zhì)原代細胞
小鼠小腸Cajal間質(zhì)細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中,，上端接幽門與胃相通,，下端通過闌門與大腸相連,，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),，上連胃幽門,，下接盲腸，分為十二指腸,、空腸和回腸三部分,。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液,、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了,。小腸管壁由粘膜,、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成,。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞,，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層,，形成管狀的腸腺,，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切,；構(gòu)成腸腺的細胞有柱狀細胞,、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞,。柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似,，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,，不形成紋狀緣,。Cajal間質(zhì)細胞（ICC）是一類主要分布于胃腸道的間質(zhì)細胞，是胃腸道的起搏細胞和信號傳導(dǎo)細胞,，與肌細胞以及末梢元有著緊密的關(guān)系,，具有激發(fā)和促進胃腸蠕動的作用。借助于電子顯微鏡技術(shù),，清楚觀察到了ICC位置分布和內(nèi)部精細結(jié)構(gòu),；應(yīng)用免疫熒光等生化技術(shù)，發(fā)現(xiàn)了其特殊表達的c-kit蛋白,；利用電生理技術(shù)，得知多種胃腸動力障礙疾病也與其異常有關(guān),。多年來,，學者逐漸在胃腸道,、膽道、膀胱,、子宮等部位發(fā)現(xiàn)了ICC的蹤跡,，并試圖闡述其與某些疾病的發(fā)生機制。
英文名稱 | Mouse Small Intestine Cajal Mesenchymal Cells | 組織來源 | 小腸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7585 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠小腸Cajal間質(zhì)細胞
組織來源：小腸組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠小腸Cajal間質(zhì)采用膠原酶消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠小腸Cajal間質(zhì)經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
CM-H107人軟骨細胞培養(yǎng)基100mL | 核膜糖蛋白210抗體 |
tRNA異亮連接酶抗體 | 嘧啶P450 4A1抗體 |
毛細管形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體 | 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 |
元,，肌肉特異性烯醇化酶抗體 | 橋粒斑菲素蛋白1抗體 |
雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體 | 甲胎蛋白單克隆抗體（包被） |
Hep G2, 人肝癌細胞系 | 人腦瘤細胞;SF17 |
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7 急性淋巴母細胞白血病細胞,，MOLT-4細胞 H9c2(2-1)細胞，大鼠心肌細胞 | C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞 Rattus |
酶(含100mL 酶解緩沖液) 10mL | IL7 Protein Human 重組人 IL7 / ierleukin 7 蛋白 |
J774A.1 小鼠巨噬細胞 | CL-0282HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
FaDu人咽鱗癌細胞 FaDu human pharyngeal squamous cell carcinoma MEM(GIBCO)+10%FBS | 小鼠小腸Cajal間質(zhì)原代細胞低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 |
恒河猴腎細胞;MMK2 | CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞)5×106cells/瓶×2 |
IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人細胞裂解液 (陽性對照) | IR983F(大鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 |
786-0 人腎透明細胞腺癌細胞 | 糖0脂酰肌醇錨定蛋白137抗體 |
鈣激活氯離子通道4蛋白抗體 | 人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901] |
原鈣粘蛋白γA1抗體 | 表皮生長因子受體3抗體 |
酪蛋白激酶1γ2抗體 | Hep G2, 人肝癌細胞系 |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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