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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠星形膠質(zhì)采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞 | 組織來源 | 腦組織 |
英文名稱 | Mouse Astrocyte cells | 貨號 | YS-01X7485 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細(xì)胞簡介：
小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球,，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分,，它是元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì),。每一個半球都有三個面,，即外側(cè)面（約占整個皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）,；半球表面有很多深淺不等的溝或裂,，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積,；大腦外側(cè)面重要的溝,、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝,。由于三溝裂之界隔,，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉,、顳葉,、枕葉四大部分。星形膠質(zhì)細(xì)胞,，是哺乳動物腦內(nèi)分布廣泛的一類細(xì)胞,，也是膠質(zhì)細(xì)胞中體積大的一種。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術(shù)（銀染色）顯示此類膠質(zhì)細(xì)胞呈星形,，從胞體發(fā)出許多長而分支的突起,，伸展充填在細(xì)胞的胞體及其突起之間，起支持和分隔細(xì)胞的作用,。細(xì)胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足,，有些腳板貼附在鄰近的毛細(xì)血管壁上，因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足,，靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內(nèi)表面,，彼此連接構(gòu)成膠質(zhì)界膜。細(xì)胞剛分離時呈圓形,，24h后大部分細(xì)胞貼壁,，均勻分布于瓶底，部分細(xì)胞伸出細(xì)小突起,，培養(yǎng)4-5d后細(xì)胞數(shù)量明顯增多,，呈扁平、多角形，胞質(zhì)豐富且核漿較少,，細(xì)胞核呈橢圓形,，偏于胞體一側(cè)。星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞系統(tǒng)的重要細(xì)胞組成,，不僅具有支持功能,，還能夠合成及分泌多種活性物質(zhì)，在維持元內(nèi)外環(huán)境,、生存,、遷移、免疫調(diào)節(jié),、信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、軸突生長及功能整合等方面具有重要作用。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
軟骨細(xì)胞生長添加物CGS | 白介素11受體α/IL-11Rα抗體 |
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK8蛋白抗體 | 軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體 |
胚胎干細(xì)胞RAS蛋白抗體 | 黑素皮質(zhì)素受體5抗體 |
2號染色體開放閱讀框71抗體 | 酶動力蛋白2抗體 |
酸化細(xì)胞角蛋白8抗體 | 羥類固醇脫氫酶17β3抗體 |
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人齒根膜韌帶成纖維細(xì)胞(HPDLF)( 5×105 ) rEPC,，大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 Rattus |
婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-3 | ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACIIB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
ICAM2 Others Human 人 CD102 / ICAM2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CPLX3 Others Human 人 CPLX3 / Complexin 3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Hela 299(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2EpiCM-2 | HA Others H4N8 甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CM-H069人膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞黑素皮質(zhì)素受體5抗體 |
8. 骨骼肌細(xì)胞系統(tǒng) | 敘利亞倉鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1 |
人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HIMECL | A-431(人表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H131人角膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人羊膜細(xì)胞;HA |
小鼠淋巴瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1) 小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 過敏毒素C4/補體C4抗體 |
生物鐘KAT13D蛋白抗體 | CLEC5A Others Cynomolgus 食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白BAMBI抗體 | 酸化細(xì)胞核分離基因C蛋白抗體 |
腸和大腦特定同源蛋白1抗體 | EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán),。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
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