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詳細(xì)介紹
小鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
小鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自眼球脈絡(luò)膜組織,；脈絡(luò)膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間,，含有豐富血管和色素細(xì)胞，對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差,，當(dāng)眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過體傳到后極部時,，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡(luò)膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血,。脈絡(luò)膜呈暗褐色,，圍繞視乳頭部有照膜,，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū),。脈絡(luò)膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織,、小血管和毛細(xì)血管組成,，軟而薄，棕紅色,，在鞏膜和視網(wǎng)膜之間,，續(xù)連于睫狀體后方。脈絡(luò)膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層,，其含有的豐富色素起遮光暗房作用,。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及體，并有遮光作用,，使反射的物象清楚,。同時對視覺系統(tǒng)起保護(hù)作用，對整個視覺有調(diào)節(jié)作用,。續(xù)連于睫狀體后方,，含豐富的血管和色素細(xì)胞，有營養(yǎng)和遮光作用,。
英文名稱 | Mouse Choroidal Microvascular Endothelial Cells | 組織來源 | 脈絡(luò)膜組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7549 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源：脈絡(luò)膜組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
豬腎細(xì)胞;PK-15 | 含亮膠質(zhì)瘤失活蛋白4抗體 |
SEC63域內(nèi)含蛋白1抗體 | 細(xì)胞連接相關(guān)蛋白1抗體 |
瘤促活化因子3抗體 | 蛋白酶體PSMD3抗體 |
調(diào)節(jié)蛋白1抗體 | 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白8抗體 |
鋅指蛋白Zdhhc18抗體 | 15抗體 |
BPH-1, 人前列腺增生細(xì)胞 | 腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
Raji細(xì)胞，人Butt`s淋巴瘤細(xì)胞 C57小鼠黑色素瘤瘤株,ME細(xì)胞 人腎近曲小管上皮細(xì)胞裂解物HRPTEpiCL | NCI-H23(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人髓核細(xì)胞HNPC | KiMA(人胚腎上皮細(xì)胞系) 5×106cells/瓶×2 |
OP9 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 | CL-0244WISH(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
9L-E細(xì)胞,，人前列腺癌細(xì)胞 果子貍腎上皮細(xì)胞,Hed68細(xì)胞 小鼠腦脊元MN-r | 小鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞蛋白酶體PSMD3抗體 |
冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | (+)9811細(xì)胞,，人胃癌細(xì)胞 人骨肉瘤細(xì)胞,SP20細(xì)胞 人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF |
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | HB611(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
CM-M096小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 胎盤泌乳素抗體 |
富含亮跨膜纖連蛋白3抗體 | 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞HRPEpiC |
有絲分裂原誘導(dǎo)基因6抗體 | 伴侶蛋白bc1同源復(fù)合體抗體 |
跨膜轉(zhuǎn)運蛋白21抗體 | BPH-1, 人前列腺增生細(xì)胞 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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