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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠骨髓DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞,、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠骨髓樹突狀細胞經(jīng)CD86免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠骨髓樹突狀原代細胞(DC細胞) | 組織來源 | 骨髓 |
英文名稱 | Mouse Bone Marrow Immature Dendritic Cells | 貨號 | YS-01X7468 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠骨髓樹突狀細胞分離自骨髓,；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用,，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌,、病毒等,；某些淋巴細胞能制造抗體。因此,，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,，稱為紅骨髓,。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大,，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的,；DC細胞，全稱樹突狀細胞(DC),，是近年來倍受們關注的專職抗原呈遞細胞(APC),，能攝取、加工及呈遞抗原,，啟動T細胞介導的免疫反應,。由美國學者Steinman于1973年在淋巴結中發(fā)現(xiàn)，從脾臟中分離出一類與粒細胞,、巨噬細胞和淋巴細胞形態(tài)和功都不同的白細胞,，因其細胞膜向外伸出，形成與細胞軸突相似的膜性樹狀突起,，故而命名為樹突狀細胞,。未成熟DC具有較強的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型T細胞,，處于啟動,、調(diào)控、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié),。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態(tài) 樹突狀
傳代特性 屬于高度分化細胞,；屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品：
SH-SY5Y細胞,，母細胞瘤細胞 人膽囊癌細胞,GBC-SD細胞 CL-0048Ca Ski(人上皮細胞)5×106cells/瓶×2 | 果蠅CG6856-PA抗體 |
RNA結合蛋白片段Y染色體家族蛋白1抗體 | 細胞間粘附分子-2抗體 |
0脂轉移蛋白抗體 | 蛋白酪激酶ATK抗體 |
前體細胞表達發(fā)育下調(diào)蛋白5抗體 | 脯氨酰羥化酶抗體 |
鋅指蛋白828抗體 | 基質(zhì)金屬蛋白酶28抗體 |
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株;7WCY1.0 | F344大鼠骨髓間質(zhì)干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells |
U373細胞，人腦膠質(zhì)瘤細胞系 福氏志賀氏菌(Shigella flexneri) 人無色素睫狀上皮細胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μg | SK-N-BE(2) (人母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 |
細胞培養(yǎng)基NM-prf | Hela 299(人細胞) 5×106cells/瓶×2 |
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3 | Sars結構蛋白表達株;293sars181A |
SiHa細胞,，人細胞 小鼠血細胞,WEHI-3細胞 子宮成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 小鼠骨髓樹突狀原代細胞(DC細胞)蛋白酪激酶ATK抗體 |
小鼠源細胞 | HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) HA 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-H067人腎系膜細胞培養(yǎng)基100mL | 扁桃體上皮細胞培養(yǎng)基TEpiCM-prf |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5 | 髓過氧化物酶抗體 |
分子伴侶復合體TCP-1β抗體 | HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2 |
陰離子轉運蛋白-3抗體 | 半胺酸蛋白酶4/11抗體 |
跨膜蛋白158抗體 | 人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株;7WCY1.0 |
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