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詳細(xì)介紹
小鼠骨髓來源巨噬原代細(xì)胞
小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞分離自骨髓,；骨髓是機(jī)體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細(xì)胞,、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細(xì)菌、病毒等,；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體,。因此，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓,。出生時(shí),，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大,，脂肪細(xì)胞增多,，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬,、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象,。巨噬細(xì)胞較易獲得，便于培養(yǎng),，并可進(jìn)行純化,。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周,，多用做原代培養(yǎng),，難以長(zhǎng)期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,，源自單核細(xì)胞,，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞,。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫),。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對(duì)病原體作出反應(yīng),。
英文名稱 | Mouse Bone Marrow-Derived Macrophage Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7441 |
細(xì)胞形態(tài) | 巨噬細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞
組織來源：骨髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 （12mM）
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓來源巨噬采用分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)分化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓來源巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
H9c2(2-1)大鼠心肌細(xì)胞 H9c2 (2-1) in myocardial cells of rats DMEM+10%FBS+1%P/S | 果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體 |
RNA結(jié)合蛋白QK1抗體 | 細(xì)胞間粘附分子-1抗體 |
0脂酰乙結(jié)合蛋白1抗體 | 蛋白酪激酶9抗體 |
前體細(xì)胞表達(dá)蛋白1抗體 | 脫氫酶抗體 |
鋅指蛋白81抗體 | 基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗體 |
IGF1 Protein Human 重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白 | MEG-01 人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
MSTO-211H人肺癌細(xì)胞株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | MIF Protein Human 重組人 MIF / GLIF 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 |
大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CL-0224SW579(人甲狀腺鱗癌細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2 |
LLC小鼠Lewis肺癌細(xì)胞 LLC mice with Lewis lung cancer cells DMEM+10%FBS | 小鼠骨髓來源巨噬原代細(xì)胞蛋白酪激酶9抗體 |
狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞;DH82 | CM-H075人腎足突細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
人卵巢畸胎瘤細(xì)胞;PA-1 人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 豬腎細(xì)胞;PK(15) |
膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 酸性粒體肌酸激酶抗體 |
分子伴侶CESK1蛋白抗體 | 人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞裂解物HHGMCL |
陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 | 半胺酸蛋白酶-2抗體 |
跨膜蛋白147抗體 | IGF1 Protein Human 重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
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