化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
小鼠睪丸支持原代細胞
小鼠睪丸支持細胞分離自睪丸；睪丸支持細胞又稱Sertoli細胞,，在體內(nèi)呈不規(guī)則的高錐體形,，細胞基部附著在基膜上，頂部伸至曲精小管腔面,。它是生精細胞的支架，為其提供必需的營養(yǎng)物質(zhì),，能合成與分泌雄激素結(jié)合蛋白,，為其提供高濃度的雄激素環(huán)境等，還具有構成血-睪屏障,，形成睪丸內(nèi)微環(huán)境,，調(diào)節(jié)發(fā)生等功能。睪丸支持細胞是睪丸的主要組成細胞,，能分泌多種生長因子和免疫抑制因子,，不僅可為提供營養(yǎng)支持和免疫保護，也能對其他細胞,，如胰島和細胞提供營養(yǎng)支持,，而且當其與胰島或細胞共移植時，也能夠為這些細胞提供免疫保護,，提高植活率,。因此，睪丸支持細胞在細胞移植中具有廣泛的應用前景,。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎研究有重要價值,，而且在發(fā)生等領域有重要意義。
英文名稱 | Mouse Sertoli Cells | 組織來源 | 睪丸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7405 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠睪丸支持細胞
組織來源：睪丸組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠睪丸支持采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠睪丸支持經(jīng)Fas-L免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7) | 胰島素受體抗體 |
酸化心臟0蛋白抗體 | 腫瘤/抗原77抗體 |
肢體畸形相關蛋白FHOD1抗體 | 微管相關蛋白1B抗體 |
半胺酸蛋白酶蛋白-4抗體 | 結(jié)蛋白抗體 |
1號染色體開放閱讀框172抗體 | 組蛋白H2A/S抗體 |
ALOX15B Others Human 人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | T-47D(人管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人表皮黑色素細胞-淺色素HEM-l | CD22 Others Human 人 Siglec-2 / CD22 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SPINK4 Others Human 人 SPINK4 人細胞裂解液 (陽性對照) | SPARCL1 Others Mouse 小鼠 SPARCL1 / SPARC-like 1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
LLC(小鼠肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | QG-56(人肺扁平上皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2 L-02(正常肝細胞) |
CM-M064小鼠前列腺上皮細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠睪丸支持原代細胞微管相關蛋白1B抗體 |
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Brevig Mission/1/1918) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) | C57BL/6小鼠脂肪間質(zhì)干細胞 C57BL/6 mouse adipose mesenchymal stem cells |
大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106 | HeLa-S3細胞,，人細胞 小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3),PA12細胞 主動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) | 4號染色體開放閱讀框17抗體 |
層粘連蛋白B2γ1抗體 | Gibco 10639011 STEM PRO-34- COMBO 500ml |
骨髓基質(zhì)干細胞抗原1抗體 | 原癌基因N-Ras抗體 |
糖代謝相關蛋白1抗體 | ALOX15B Others Human 人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
化工儀器網(wǎng)