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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠肝外膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,，接種至預先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中,，通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠肝外膽管上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠肝外膽管上皮原代細胞 | 組織來源 | 膽管組織 |
英文名稱 | Mouse Extrahepatic Bile Duct Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7413 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠肝外膽管上皮細胞分離自肝外膽管組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,，并在身體里面起著去氧化,、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用,；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官，位于機體中的腹部位置,，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,，胃的上方,。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官,，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結構：肝臟位于右上腹,，隱藏在右側膈下和肋骨深面,，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區(qū),、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,，肝上面則與膈及腹前壁相接。臨床上常見的膽管病變?nèi)缒懙篱]鎖,、先天性膽總管囊腫,、原發(fā)性硬化性膽管炎等，都是以膽管上皮細胞為病變的靶位,，引起膽管上皮的損傷,。了解正常膽管上皮細胞的生物學特征和病變膽管上皮細胞的病理生理學特征對研究膽管病變的發(fā)病機制、診斷和治療具有重要意義,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品：
D407細胞，人視網(wǎng)膜色素上皮細胞 出芽短梗霉 人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572) | 廣譜細胞角蛋白PCK抗體 |
RMND5B蛋白抗體 | 細胞核受體Rev-Erbα抗體 |
0脂?；嫉鞍拙厶?span>2抗體 | 蛋白激酶錨定蛋白抗體 |
母細胞特異性轉(zhuǎn)移因子抗體 | 平滑肌鈣調(diào)蛋白CNN2抗體 |
鋅指蛋白693抗體 | 基質(zhì)金屬蛋白酶18/19抗體 |
ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 標簽) | 小鼠胚胎成纖維細胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1) |
Bel-7405細胞,，人肝癌細胞 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細胞,PA317細胞 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21 | L6(大鼠成肌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
小氣道上皮細胞培養(yǎng)基SAEpiCM-prf | HCC38(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人支氣管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 人生發(fā)基質(zhì)細胞cDNAHHGMC cDNA |
Hela P10s-11F細胞，人細胞 小鼠母細胞瘤細胞與大鼠膠質(zhì)瘤細胞之融合細胞,NG108-15細胞 支氣管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 小鼠肝外膽管上皮原代細胞蛋白激酶錨定蛋白抗體 |
CL-0123IBRS-2(豬腎細胞)5×106cells/瓶×2 | HEp-2(人喉表皮樣癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0450SW 982(人滑膜肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2 人上皮細胞;MCF-10A |
HA Others H5N9 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | CM-M058小鼠膀胱上皮細胞培養(yǎng)基100mL |
GREM1 Protein Mouse 重組小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 標簽) | 酸性核0蛋白32家族B抗體 |
分泌型免疫球蛋白A抗體 | IEC-6 大鼠小腸引窩上皮細胞 |
抑制素α/Inhibin α抗體 | 半蛋白酶8相關蛋白2抗體 |
口蹄疫病毒A型抗體 | ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 標簽) |
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