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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠肝竇內(nèi)皮采用混合酶灌流消化,、反復低速離心、密度梯度離心法,，并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠肝竇內(nèi)皮經(jīng)CD31,、CD14免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠肝竇內(nèi)皮原代細胞 | 組織來源 | 肝臟組織 |
英文名稱 | Mouse Hepatic Sinusoidal Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7161 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠肝竇內(nèi)皮細胞細胞分離自肝臟組織,；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用,；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官，位于機體中的腹部位置,，在右側橫隔膜之下,，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方,。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺,，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,，又是新陳代謝的重要器官,。肝臟在機體位置和形態(tài)結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面,，大部分肝為肋弓所復蓋,，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,，肝上面則與膈及腹前壁相接,。肝竇內(nèi)皮細胞（SEC）是肝臟內(nèi)所占比例高的非實質(zhì)細胞，位于肝竇腔與肝細胞之間,，具有物質(zhì)轉運,、吞噬、抗原提呈,、免疫耐受等功能,。SEC由于擁有一般細胞所沒有的窗孔結構、細胞間連結松散,、內(nèi)皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,，從而達到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時,，肝竇內(nèi)皮細胞窗孔逐漸減少或消失,，內(nèi)皮下基膜形成，產(chǎn)生類似于連續(xù)型毛細血管的結構,，這一過程稱為肝竇毛細血管化,。它由多種因素引起，其過程極復雜,，在多種肝病的發(fā)病前期階段均有出現(xiàn),，近年來受到廣泛關注。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品：
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3 | 白介素-16抗體 |
過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β抗體 | α酪蛋白抗體 |
彈性蛋白結合蛋白Fcn2抗體 | 黑素皮質(zhì)素2受體輔助蛋白2抗體 |
補體C4a+C4b蛋白抗體 | DNA甲基轉移酶1抗體 |
1號染色體開放閱讀框180抗體 | 熱休克蛋白受體家族蛋白7B2抗體 |
人腎皮質(zhì)上皮細胞(HRCEpiC)( 5×105 ) | Gibco 12558-011 TM-C100 Complete Medium,(system) 1 set |
人表皮黑色素細胞-中色素cDNAHEM-m cDNA | FGF21 Others Mouse 小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HAVCR1 Others Rat 大鼠 KIM1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液 (陽性對照) | IL2RB Others Mouse 小鼠 CD122 / IL2RB / IL2 Receptor beta 人細胞裂解液 (陽性對照) |
大鼠小膠質(zhì)細胞(RM)(5×105) JEC, 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系 Human | NA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 酶 (Neuraminidase / NA) (N295S mutation) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-M087小鼠軟骨細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠肝竇內(nèi)皮原代細胞黑素皮質(zhì)素2受體輔助蛋白2抗體 |
GLIPR1 Others Mouse 小鼠 GLIPR1 / RTVP1 人細胞裂解液 (陽性對照) | AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標簽) |
人鼻咽癌細胞;CNE-2Z | EFNB2 Others Human 人 EFNB2 / EphrinB2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
小鼠腦瘤細胞;BC3H1 小鼠氣管和支氣管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 睫狀營養(yǎng)因子抗體 |
酸化T細胞活化連接蛋白抗體 | 馬間葉干細胞(脂肪)(5×105) |
腦轉錄因子4蛋白抗體 | 核受體輔助抑制因子1抗體 |
半乳糖凝集素相關蛋白A抗體 | 人腎皮質(zhì)上皮細胞(HRCEpiC)( 5×105 ) |
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