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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠腹膜間皮采用混合膠原酶消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠腹膜間皮經PCK、Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產品名稱 | 小鼠腹膜間皮原代細胞 | 組織來源 | 腹膜組織 |
英文名稱 | Mouse Peritoneal Mesothelial Cells | 貨號 | YS-01X7519 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠腹膜間皮細胞分離自腹膜組織,；腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,，主要由間皮細胞構成，藉由結締組織的支持所形成的一層膜狀組織,。腹膜包覆大部分腹腔內的器官,，能分泌黏液潤濕臟器的表面,，減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液,、淋巴和組織經由腹膜與外界相連,；腹膜也具有吸收撞擊保護內臟的效果。腹膜（peritoneum）為全身面積大,、配布復雜的漿膜,，由皮及少量結締組織構成，薄而光滑,，呈半透明狀,。襯于腹、盆腔壁內表面的腹膜稱為壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄層,；覆蓋腹,、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù),、移行,，共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙，稱為腹膜腔（peritoneal-cavity）,。腹膜腔是臟,、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內有少量漿液,，在臟器活動時可減少摩擦,。腹膜間皮細胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮，是覆蓋于腹膜表面的一層細胞,。間皮細胞是構成間皮的細胞,，正常大小約為15-25微米，細胞常呈圓形或者卵圓形,。其功用是提供潤滑,，使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護,，不會互相磨損受傷,。而間皮所生產的潤滑和保護作用就是靠間皮細胞所分泌的物質來達成，分泌物多半為細胞外基質,、玻尿酸類物質,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
公司產品：
Hut-78細胞,，皮膚T細胞淋巴瘤 人血管平滑肌,T/G細胞 人低侵襲性脈絡膜黑色素素瘤細胞;OCM-1A | 抑素C/半蛋白酶抑制劑C抗體 |
Rho鳥苷酸交換因子2抗體 | 細胞骨架相關蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B抗體 |
0脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體 | 蛋白激酶MPK38抗體 |
連接蛋白2抗體 | 嘌呤ATP受體抗體 |
鋅指蛋白537抗體 | 基質金屬蛋白酶-14抗體 |
A9(小鼠皮下結締組織細胞) 5×106cells/瓶×2 | 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21 |
BEL-7404細胞，肝癌細胞 人子宮膜腺癌細胞,HEC-1-B細胞 小鼠肺腺癌低轉移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFP | 小鼠前胃癌低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);MFC-B5-GFP |
小鼠膀胱上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | IL23 Protein Marmoset 重組絨猴 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 |
CL-0197RL95-2(人子宮內膜癌細胞)5×106cells/瓶×2 | CL-0216SMMC-7721(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
4T1小鼠癌細胞 Mouse breast cancer cell 4T1 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 小鼠腹膜間皮原代細胞蛋白激酶MPK38抗體 |
高背鯽魚尾鰭細胞;GBJd | 小鼠腹水瘤細胞;S-180 小鼠角膜內皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
HCT-15(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B | 豬腎傳代細胞;IBRS-2 |
膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 酸敏感鉀離子通道蛋白3抗體 |
分泌粒蛋白3抗體 | 人腎小球內皮細胞HRGEC |
抑制蛋白結構域蛋白3抗體 | 白血病相關蛋白5抗體 |
克侖特羅/抗體 | A9(小鼠皮下結締組織細胞) 5×106cells/瓶×2 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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