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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠腸動脈內皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法,、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠腸動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產品名稱 | 小鼠腸動脈內皮原代細胞 | 組織來源 | 腸組織 |
英文名稱 | Mouse Intestinal Artery Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7126 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠腸動脈內皮細胞分離自腸動脈,；腸道指的是從胃幽門至門的消化管,。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段,。哺乳動物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的,，大腸主要濃縮食物殘渣,，形成糞便，再通過直腸經門排出體外,。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分,，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內大的微生態(tài)系統(tǒng),。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
Y2細胞,，小鼠成纖維細胞 人卵巢癌耐藥株,COC1/CDDP細胞 人食道上皮細胞裂解物HEEpiCL | 固生蛋白3抗體 |
Rho GTP酶激活蛋白20抗體 | 細胞分裂周期相關蛋白1抗體 |
酸脂酸水解酶2抗體 | 蛋白激酶C beta 1/2抗體 |
激肽A受體/K物質受體抗體 | 配對盒基因9抗體 |
鋅指蛋白420抗體 | 雞傳染性喉氣管炎糖蛋白E抗體 |
非洲綠猴腎細胞;CV-1 | 人臍帶血單個核細胞 |
CTLL-2細胞,，小鼠T細胞 人前列腺癌細胞,9L-B細胞 人絨毛間葉成纖維細胞RNAHVMF miRNA5 μg | 恒河猴皮膚細胞;RM-S1 |
小鼠皮下脂肪細胞培養(yǎng)基 100mL | IL17A Protein Marmoset 重組絨猴 IL17 / IL17A 蛋白 |
氣管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 犬腎細胞;MDCK(NBL-2) |
L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)小鼠淋巴瘤細胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C) in mouse lymphoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS | 小鼠腸動脈內皮原代細胞蛋白激酶C beta 1/2抗體 |
Neuro-2a/N2a(小鼠腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 | CDK7 & CCNH & MNAT1 Others Human 人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
人細胞;Hela S3 [HeLaS3] 大鼠大隱靜脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | 小鼠腎小管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
T-112B乳蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL | 四分子交聯(lián)體3抗體（四旋蛋白） |
肺癌抑癌蛋白1抗體 | C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME (Me) |
抑癌基因p16/p14/P19抗體 | 白細胞介素-7受體a抗體 |
顆粒酶B抗體 | 非洲綠猴腎細胞;CV-1 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次,，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
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