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詳細(xì)介紹
小鼠腸道干原代細(xì)胞
小鼠腸道干細(xì)胞分離自腸道組織,；腸道指的是從胃幽門至門的消化管,。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段,。哺乳動物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的，大腸主要濃縮食物殘?jiān)?，形成糞便,，再通過直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物,，以提供足夠的養(yǎng)分，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng),。腸道干細(xì)胞（ISC）也稱腸道上皮干細(xì)胞,，主要位于腸黏膜隱窩內(nèi)，其與腸道黏膜上皮的更新和修復(fù)密切相關(guān),。正常情況下,，位于隱窩基底部的腸道干細(xì)胞不斷向隱窩頂部（腸腔方向）遷移，整個遷移過程大約3-5d,，在遷移過程中腸道干細(xì)胞分化形成不同的腸黏膜細(xì)胞,。當(dāng)受到外界生理或病理信號作用時，ISC可持續(xù)增殖,、分化為成熟腸上皮細(xì)胞,，如腸型細(xì)胞、杯狀細(xì)胞,、內(nèi)分泌細(xì)胞和潘氏細(xì)胞等，從而維持腸道黏膜結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性,。
英文名稱 | Mouse Intestinal Stem Cells | 組織來源 | 腸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7480 |
細(xì)胞形態(tài) | 球形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠腸道干細(xì)胞
組織來源：腸組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸道干采用-膠原酶聯(lián)合消化后,，用腸道干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸道干經(jīng)MSI-1免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
兔晶體上皮細(xì)胞永生系;N/N1003A(RLE) | 白介素12抗體 |
過氧化酶活化增生受體γ抗體 | 周期素依賴性激酶樣5抗體 |
高嗜酸性粒細(xì)胞綜合癥相關(guān)蛋白FIP1L1抗體 | 蛋白裂解酶（一種新的癌基因）抗體 |
1號染色體開放閱讀框228抗體 | Notch信號通路Delta樣配體4抗體 |
1號染色體開放閱讀框53抗體 | 舞蹈癥蛋白相互作用蛋白13抗體 |
FAM3D Others Mouse 小鼠 FAM3D / Oit1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人成骨肉瘤細(xì)胞;MG-63 | IL12A&IL27B Others Human 人 IL12A & IL27B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
MERTK Others Human 人 Mer / MERTK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | SIRPA Others Mouse 小鼠 SIRP alpha / CD172a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
小鼠腦膜細(xì)胞(MMC)(5×105) CNE1, 人鼻咽癌細(xì)胞系 Human | PLAT Others Human 人 tPAβ 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CM-R012大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠腸道干原代細(xì)胞蛋白裂解酶（一種新的癌基因）抗體 |
Promocell C-26011 Renal Epithelial Cell GrowthMedium KIT, 腎上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml | 615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株;L7912 |
AtT20 小鼠垂體瘤細(xì)胞 | S-180小鼠腹水瘤細(xì)胞 Mouse S-180 ascites tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS |
CADM3 Others Rat 大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 周期素依賴性激酶2抗體 |
癌癥亮拉鏈下調(diào)因子1抗體 | EFNB1 Others Human 人 EphrinB1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
乳腺癌易感基因復(fù)合蛋白4抗體 | 激肽A受體/K物質(zhì)受體抗體 |
赤抗體 | FAM3D Others Mouse 小鼠 FAM3D / Oit1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
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