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詳細(xì)介紹
小鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞
小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞分離自肺組織,；肺泡由單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的半球狀囊泡,。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細(xì)支氣管,，它們的末端膨大成囊,，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡,。小肺泡細(xì)胞，又稱I型肺泡細(xì)胞,，厚約0.1微米,，基底部是基底膜，無增殖能力,。大肺泡細(xì)胞,，又稱Ⅱ型肺泡細(xì)胞，分泌表面活性物質(zhì)（二棕櫚酰）,，以降低肺泡表面張力,。Ⅱ型肺泡細(xì)胞位于Ⅰ型肺泡細(xì)胞之間，數(shù)量較Ⅰ型肺泡細(xì)胞多,，但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細(xì)胞小,。細(xì)胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔。細(xì)胞核圓形,，胞質(zhì)著色淺,、呈泡沫狀。電鏡下,，細(xì)胞游離而有少量微絨毛,，胞質(zhì)內(nèi)富含線粒體和溶酶體，有較發(fā)達(dá)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體,。核上方有較多的分泌顆粒,，電子密度高、大小不等,，直徑約0.1-1.0μm顆粒內(nèi)含有平行排列的板層狀結(jié)構(gòu),，稱為嗜餓性板層小體。小體內(nèi)的主要成分為磷脂，以二棕櫚酰為主,，此外還有糖胺多糖及蛋白質(zhì)等,。顆粒內(nèi)物質(zhì)釋放出來后，在肺泡表面形成一層粘液層,，稱為表面活性物質(zhì)（surfactant）,。表面活性物質(zhì)有降低肺泡表面張力、穩(wěn)定肺泡大小的作用,。呼氣時(shí)肺泡縮小,，表面活性物質(zhì)密度增加，表面張力降低,，防止肺泡過度塌陷,；吸氣時(shí)肺泡擴(kuò)張，表面活性物質(zhì)密度減小,，肺泡回縮力加大,，可防止肺泡過度膨脹。表面活性物質(zhì)的缺乏或變性均可引起肺不張,，過度通氣可造成表面活性物質(zhì)缺乏,；吸入毒氣可直接破壞表面活性物質(zhì)。Ⅱ型肺泡細(xì)胞有分裂,、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細(xì)胞的潛能,，故具有修復(fù)受損傷上皮的作用。
英文名稱 | Mouse Alveolar Type II Epithelium Cells | 組織來源 | 肺組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7006 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞
組織來源：肺組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠Ⅱ型肺泡上皮采用彈灌注消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠Ⅱ型肺泡上皮經(jīng)SP-C免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-2 | 生長抑制因子基因1抗體 |
絲/蘇蛋白激酶PCTK2抗體 | 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型衣殼蛋白抗體 |
肽基異構(gòu)酶酶FKBP8抗體 | 粒體融合蛋白1抗體 |
COG1蛋白抗體 | 抑癌蛋白DKK1抗體 |
1號染色體開放閱讀框69抗體 | 轉(zhuǎn)錄因子HELT蛋白抗體 |
NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;HCC38 | LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
A2780(人卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H115人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系);293T/17 | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
ENG Others Human 人 Endoglin / CD105 / ENG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | HAoAF Pellet 人主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人表皮黑色素細(xì)胞-深色素裂解物HELM-d L |
CM-R023大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠Ⅱ型肺泡上皮原代細(xì)胞粒體融合蛋白1抗體 |
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2) |
SW 1353(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3 細(xì)胞,，Hela細(xì)胞 HEL299(紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞) |
CD200 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體 |
微管相關(guān)蛋白輕鏈3C抗體 | 801-D (人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11 |
乳腺癌擴(kuò)增序列蛋白4抗體 | 低分子量絲蛋白抗體 |
胞漿區(qū)相關(guān)蛋白GIPC2抗體 | NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
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