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詳細(xì)介紹
兔子宮平滑肌原代細(xì)胞
兔子宮平滑肌細(xì)胞分離自子宮組織,；子宮是孕育胎兒的器官,，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間,，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈,、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí)，可以引起子宮脫垂,。子宮肌層比較厚,，由成束或成片的平滑肌組成，肌束間以結(jié)締組織分隔,。子宮平滑肌具有收縮功能,，收縮受激素的調(diào)節(jié)，其收縮活動(dòng)有助于向輸卵管運(yùn)送,、經(jīng)血排出以及胎兒娩出,。子宮平滑肌層含有大量的血管,，如果平滑肌層細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)，勢(shì)必造成血管壁的增厚,，管腔堵塞,，體外培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機(jī)制。子宮平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,，胞漿豐富,，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),，高低起伏,；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。子宮平滑肌細(xì)胞的主要功能：①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態(tài),，在孕期能大化的擴(kuò)張子宮容積,，保證胎兒孕育環(huán)境；②平滑肌細(xì)胞有收縮舒張能力,，在生產(chǎn)時(shí)能形成生理性的縮腹環(huán),，推動(dòng)胎兒向下移動(dòng)，輔助生產(chǎn),。
英文名稱(chēng) | Rabbit Uterine Smooth Muscle Cells | 組織來(lái)源 | 子宮組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7144 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱(chēng)：兔子宮平滑肌細(xì)胞
組織來(lái)源：子宮組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔子宮平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔子宮平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
A3細(xì)胞，人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞,15P-1細(xì)胞 少突膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)添加物OGS | 骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體 |
RAS抑制蛋白1抗體 | 細(xì)胞分裂周期蛋白2亞型1抗體 |
酸葡萄糖酸內(nèi)酯酶抗體 | 蛋白激酶A抗體 |
叢蛋白B3抗體 | 胚胎干細(xì)胞抑制蛋白Suz12抗體 |
鋅指蛋白321B抗體 | 肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白抗體 |
NCI-H2087(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | CM-R006大鼠肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
5637, 人膀胱癌細(xì)胞 蓖麻蠶卵細(xì)胞,NISE-Sacy-12細(xì)胞 TE 353.Sk(人正常皮膚細(xì)胞) | 小鼠腎足細(xì)胞;Mouse podocyte |
人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟HPA-v | 水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7) |
原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml | 人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100] |
NCI-H1869[H1869]細(xì)胞,，人肺癌細(xì)胞 人膀胱癌細(xì)胞,BIU-87細(xì)胞 人肝臟間充質(zhì)干細(xì)胞HMSC-hp | 兔子宮平滑肌原代細(xì)胞蛋白激酶A抗體 |
IFNA8 Protein Human 重組人 Ierferon alpha-B / IFNA8 蛋白 | FES Others Human 人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
A-673 人橫紋肌瘤細(xì)胞 A-673 rhabdomyoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS | 卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基OEpiCM |
T-109B彈(含100mL酶解緩沖液)10mL | 四分子交聯(lián)體10抗體（四旋蛋白） |
肥大細(xì)胞類(lèi)白酶1抗體 | CoC1(人卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
抑癌蛋白DKK3抗體 | 白細(xì)胞介素28受體抗體 |
抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體（仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139） | NCI-H2087(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類(lèi),；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
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