詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
細(xì)胞屬性:
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞 | 組織來源 | 子宮 |
英文名稱 | Rabbit Endometrial Stromal Cells | 貨號(hào) | YS-01X8487 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介:
兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞分離自子宮組織,;子宮是孕育胎兒的器官,,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈,、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),可以引起子宮脫垂,。子宮內(nèi)膜即黏膜,,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,,稱為基質(zhì)細(xì)胞)組成,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,,功能層較厚,,約占內(nèi)膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,,約占1/5,,功能層可剝脫,而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞主要功能:①子宮內(nèi)膜亦稱子宮黏膜,,是指構(gòu)成哺乳類子宮內(nèi)壁的一層,;②子宮內(nèi)膜對(duì)動(dòng)情素和孕激素都起反應(yīng),因此可隨著性周期(發(fā)情周期,、月經(jīng)周期)發(fā)生顯著的變化,。子宮內(nèi)膜與胚胎附植密切相關(guān),在生殖生理的研究中占重要地位,。在胚胎與母體“對(duì)話"的過程中,,子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞充當(dāng)了極其重要的角色。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的內(nèi)層,,位于子宮腔面,,在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官,,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能,。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
公司產(chǎn)品:
豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1 | 擬南芥IKI3抗體 |
母細(xì)胞瘤蛋白PHOX2B抗體 | 鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1抗體 |
細(xì)絲蛋白2抗體 | 巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗體 MIP-1β |
酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 | 單克隆抗體 |
1號(hào)染色體開放閱讀框87抗體 | 同源盒蛋白HOXC9抗體 |
人滑膜細(xì)胞(HS)( 5×105 ) | 人結(jié)膜纖維原細(xì)胞(HConF)(5×105 ) HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Human |
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30 | ENPEP Others Rat 大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A (aa 41-945) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
A172(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H107人軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1 | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0102Hep 3B(人肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-180 | PBK Others Human 人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
CM-R031大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗體 MIP-1β |
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/35820/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK |
人癌細(xì)胞;MDA-MB-157 | PDCD1LG2 Others Human 人 PD-L2 / B7-DC / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
白牦牛皮膚細(xì)胞;Yak-2 橫紋肌瘤細(xì)胞,,A673細(xì)胞 NAMALWA(Butt's 淋巴瘤細(xì)胞) | N-鈣粘附分子抗體 |
宮頸癌原癌基因2抗體 | 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生兒(HEK-n)( 5×105 ) |
BCL2樣12含蛋白抗體 | 鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6抗體 |
丙型肝炎病毒-NS3反轉(zhuǎn)錄激活蛋白2抗體 | 人滑膜細(xì)胞(HS)( 5×105 ) |
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),,PBS沖洗3次,,每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,,每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,每次3min,。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán),。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),,以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。