詳細(xì)介紹
兔子宮頸上皮原代細(xì)胞
兔子宮頸上皮細(xì)胞分離自子宮頸組織;子宮頸位于子宮下部,,近似圓錐體,,上端與子宮體相連,下端深入陰道,。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分:宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部,,在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部。宮頸的中央為前后略扁的長梭性管腔,,其上端通過宮頸內(nèi)口與子宮腔相連,,其下端通過宮頸外口開口于陰道。內(nèi)外口之間即宮頸管,。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化,;宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成,。子宮頸可有多種疾病,,包括胚胎發(fā)育異常、炎癥,、瘤樣病變,、良性腫瘤、惡性腫瘤,、損傷,、宮頸性不孕、輔助生育技術(shù),、宮頸與性,、宮頸妊娠等許多問題,體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細(xì)胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
英文名稱 | Rabbit Cervical Epithelial Cells | 組織來源 | 子宮 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8485 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔子宮頸上皮細(xì)胞
組織來源:子宮
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔子宮頸上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的兔子宮頸上皮采用膠原酶消化法,,結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的tu子宮頸上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1 | 胰島素降解酶抗體 |
細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶5激活因子1抗體 | 阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關(guān)膠原蛋白抗體 |
酸化細(xì)絲蛋白2抗體 | 間皮素抗體 |
微管結(jié)合蛋白CYLD抗體 | 抑癌蛋白DKK3抗體 |
1號染色體開放閱讀框95抗體 | 調(diào)節(jié)蛋白1β2抗體 |
CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | SLAMF7 Others Mouse 小鼠 SLAMF7 / CRACC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474 | CD84 Others Mouse 小鼠 CD84 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人脈絡(luò)絲內(nèi)皮細(xì)胞 (HCPEC)( 5×105 ) 人臍動脈平滑肌細(xì)胞 Raji,,人Butt's淋巴瘤細(xì)胞 | SHH Others Mouse 小鼠 SHH / Sonic hedgehog 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
MDA-MB-231(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | MCF-7細(xì)胞,人癌細(xì)胞 人肺鱗癌細(xì)胞,LTEP-s細(xì)胞 滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
CM-R033大鼠肝實質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 兔子宮頸上皮原代細(xì)胞間皮素抗體 |
豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1 貂肺上皮細(xì)胞,,Mv.1.Lu細(xì)胞 GT1-1細(xì)胞,,小鼠垂體瘤細(xì)胞 | 人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞cDNAHCPF cDNA |
CM-H134人角膜內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | TACSTD2 Others Mouse 小鼠 OP2 / TACSTD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
IL11RA Others Human 人 IL11RA / IL11Rα 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 肌酸酸激酶2抗體 |
賴氨酰氧化酶樣蛋白4抗體 | 人十二脂腸腺癌;HuTu-80 大鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
BCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體 | 氫通道蛋白抗體 |
谷甘肽硫轉(zhuǎn)移酶C段結(jié)構(gòu)域抗體 | CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |