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兔主動脈內(nèi)皮原代細胞
兔主動脈內(nèi)皮細胞分離自主動脈組織,；主動脈是體循環(huán)的動脈主干,。其運行路徑為：升主動脈起于左心室,，至右側(cè)第2胸肋關節(jié)高度移行為主動脈弓,，弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈,；在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,，以上為胸主動脈，至第4腰椎體下緣分為左,、右髂總動脈,；髂總動脈在骶髂關節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動脈,。主動脈內(nèi)皮細胞是覆蓋在主動脈內(nèi)面的單層細胞,，可分泌一系列血管活性物質(zhì)而保持血管穩(wěn)態(tài)，當其受到炎癥或其它因素刺激后穩(wěn)態(tài)被破壞而導致一些心血管疾病的發(fā)生,。因此,，主動脈內(nèi)皮細胞已成為研究心血管疾病發(fā)病機制及治療藥物的工具。內(nèi)皮細胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細胞,，由一層扁平細胞所組成,。它形成血管的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口,。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng),，由心臟直至小的微血管。
英文名稱 | Rabbit Aortic Endothelial Cells | 組織來源 | 主動脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7120 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔主動脈內(nèi)皮細胞
組織來源：主動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
方法簡介
公司實驗室分離的兔主動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的兔主動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
HL細胞，體細胞系 人組織細胞淋巴瘤細胞,U937細胞 小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32 | 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2抗體 |
RAS相關抑細胞生長蛋白1抗體 | 細胞分裂周期蛋白20B抗體 |
酸肌醇相互作用蛋白抗體 | 蛋白二硫鍵異構酶P4HB抗體 |
叢蛋白A1抗體 | 胚胎干細胞RAS蛋白抗體 |
鋅指蛋白281抗體 | 肌側(cè)索硬化癥相關蛋白HECW1抗體 |
BEL-7402(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | CL-0463UM-UC-3(人膀胱移行細胞癌)5×106cells/瓶×2 |
人腎癌細胞;A498 大鼠心肌成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | raw264.7 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 |
人脊柱間充質(zhì)干細胞HVMSC | IM-9(人外周血B淋巴細胞) 5×106cells/瓶×2 |
CL-0093HCC1937(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 白細胞介素-6超家族 |
JEG-3/VP16細胞,，人絨癌細胞耐藥株 新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞,NBTF細胞 人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞HAMSC | 兔主動脈內(nèi)皮原代細胞蛋白二硫鍵異構酶P4HB抗體 |
MDA-MB-231, 人癌細胞 | CD40 Others Mouse 小鼠 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SW480 [SW-480]人結(jié)腸腺癌細胞 SW480 [SW-480] human colon adenocarcinoma cells 1640+10% FBS | 上皮細胞培養(yǎng)基-2EpiCM-2 |
T-108A膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL | 死亡相關蛋白3抗體 |
非受體酪激酶c-Abl抗體 | CCL24 Protein Human 重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標簽) |
異質(zhì)核糖核蛋白U抗體 | 白細胞介素1受體銜接蛋白抗體 |
抗菌肽CAMP抗體 | BEL-7402(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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