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詳細介紹
兔脂肪原代細胞
兔脂肪細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成,，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉,；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸,，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用,。它們影響胰島素敏感性、血壓水平,、內(nèi)皮功能,、纖溶活動及炎癥反應,，參與多種重要病理生理過程,；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪細胞分為白色脂肪細胞和褐色（棕色）脂肪細胞,，常呈白色,，在嬰幼兒期大量增殖，到青春期數(shù)量達到巔,，此后數(shù)量一般不再增加,。細胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡，稱為脂質(zhì)泡,，富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),。此外，還有一種褐色脂肪細胞，在動物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間,、頸背部,、腋窩、縱隔及腎臟周圍,，含有高度團縮的褐色脂肪,，作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱，調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例,。
英文名稱 | Rabbit Adipocyte Cells | 組織來源 | 脂肪 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8480 |
細胞形態(tài) | 梭形,、多角形、圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔脂肪細胞
組織來源：脂肪
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：梭形,、多角形,、圓形
傳代特性：屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
兔脂肪細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔脂肪采用膠原酶-酶聯(lián)合消化法獲得前脂肪細胞,，經(jīng)成脂誘導培養(yǎng)基誘導培養(yǎng)制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔脂肪經(jīng)油紅O染色檢測,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
人臍動脈內(nèi)皮細胞 人正常胚肺成纖維細胞,，MRC-5細胞 SHZ-88(癌細胞) | 骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體 |
Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體 | 細胞分裂周期蛋白14B抗體 |
酸肌醇酸酶蛋白I5抗體 | 蛋白S抗體 |
酶4抗體 | 皰疹病毒相關(guān)泛素特異7抗體 |
鋅指蛋白263抗體 | 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白FGGY抗體 |
人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16 | CoC2(懸浮) 卵巢癌 |
COLO 205人結(jié)腸癌細胞 COLO 205 human colon cancer cells 1640+10% FBS | TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 |
人臍靜脈內(nèi)皮細胞HUVEC | 鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu |
腦動脈血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人腦膜細胞cDNAHMC cDNA |
NCI-H226[H226]細胞,，人肺癌細胞 人膀胱移行細胞癌細胞,T24細胞 人絨毛膜毛細血管內(nèi)皮細胞HVCEC | 兔脂肪原代細胞蛋白S抗體 |
人結(jié)直腸腺癌細胞;LoVo | 人胚肺二倍體細胞;KMB-17 人甲狀腺濾泡上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HVVEC)( 5×105 ) | CM-M034小鼠肝動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL |
IL10 Protein Human 重組人 IL10 / Ierleukin-10 蛋白 (His 標簽) | 死亡受體4抗體 |
非平滑肌肌球蛋白2A抗體 | CL-0457TT(人甲狀腺導管癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
異質(zhì)核糖核蛋白L抗體 | 白細胞介素19抗體 |
抗菌蛋白DCD抗體 | 人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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