詳細介紹
兔脂肪間充質(zhì)干原代細胞
兔脂肪間充質(zhì)干細胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成,,聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉,;貯存的脂肪,,在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用,。它們影響胰島素敏感性,、血壓水平、內(nèi)皮功能,、纖溶活動及炎癥反應(yīng),,參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng),。脂肪組織中也存在一些干細胞群,,具有自我更新能力和多向分化潛能,被稱為脂肪組織來源的間充質(zhì)干細胞,,簡稱脂肪間充質(zhì)干細胞,。與骨髓間充質(zhì)干細胞相比,在來源,、細胞群特點以及分化潛能等多方面極為相似,。但是,脂肪間充質(zhì)干細胞更易獲得足夠數(shù)量的細胞,,且獲取過程中對機體損傷更小,,是更為理想的自體干細胞源,。脂肪組織分離得到脂肪間充質(zhì)干細胞以梭形為主要形態(tài),BrdU可標(biāo)記其細胞核,。
英文名稱 | Rabbit Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells | 組織來源 | 脂肪組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7116 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔脂肪間充質(zhì)干細胞
組織來源:脂肪組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
方法簡介
公司實驗室分離的兔脂肪間充質(zhì)干采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的兔脂肪間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細胞直接離心收集,,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
豚鼠皮膚細胞;GP-S3 | 胰島素樣生長因子I受體抗體 |
凋亡誘導(dǎo)受體PLEKHG5抗體 | 病毒包膜糖蛋白E2抗體 |
果糖胺-3激酶抗體 | 基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體 |
組織蛋白酶E抗體 | Notch信號通路Delta樣配體1抗體 |
20號染色體開放閱讀框144抗體 | 乳腺癌增強蛋白抗體 |
CBLC Others Human 人 Cbl-c / CBL-3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細胞;OCM-1A | CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SCARB2 Others Mouse 小鼠 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人細胞裂解液 (陽性對照) | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SERPINA7 Others Human 人 SerpinA7 / TBG 人細胞裂解液 (陽性對照) | BT-474細胞,,人導(dǎo)管瘤細胞 轉(zhuǎn)化的豚鼠胎體細胞,104C1細胞 甲狀腺癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml |
CM-R045大鼠小腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基100mL | 兔脂肪間充質(zhì)干原代細胞基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體 |
NCI-295R細胞,人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞 小鼠艾氏腹水瘤細胞TCM15,S180細胞 CL-0226SW626(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3 |
CM-H096人關(guān)節(jié)軟骨細胞培養(yǎng)基100mL | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
SUP-B15(人Ph+急淋白血病細胞系) 5×106cells/瓶×2 SHZ-88(大鼠癌細胞) | 1號染色體開放閱讀框195抗體 |
轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白4抗體 | L-6TG細胞,,肌母細胞 人前列腺癌細胞,JCA-1細胞 人胚肺成纖維細胞;MRC-5 |
堿性亮拉鏈蛋白BZW1抗體 | NYS48蛋白抗體 |
G蛋白偶聯(lián)受體71抗體 | CBLC Others Human 人 Cbl-c / CBL-3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |