詳細(xì)介紹
兔胰腺腺泡原代細(xì)胞
兔胰腺腺泡細(xì)胞分離自胰腺組織,;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道,。胰液中含有,、原,、脂肪酶、等,。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸,,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞,、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞,。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖,;β細(xì)胞分泌胰島素,,降低血糖;γ細(xì)胞分泌,,以旁分泌的方式抑制α,、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,,抑制胃腸運(yùn)動(dòng),、胰液分泌和膽囊收縮。胰腺泡主要由錐體形的腺泡細(xì)胞組成,,與閏管相連,,外有基膜,為典型的蛋白質(zhì)分泌細(xì)胞,。胰腺泡可分泌多種消化酶,,如原、胰白酶原,、胰,、胰脂肪酶、DNA 酶和RNA 酶等,,分別消化食物中的營(yíng)養(yǎng)成分 ,;胰腺泡也分泌抑制因子,,防止兩種蛋白酶原被激活,腺泡腔內(nèi)有泡心細(xì)胞,,扁平或立方形,,色淺,是閏管起始部的上皮細(xì)胞,,為胰腺腺泡的特點(diǎn),。
英文名稱(chēng) | Rabbit Pancreatic Acinar Cells | 組織來(lái)源 | 胰腺 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X8473 |
細(xì)胞形態(tài) | 短梭形,多角形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱(chēng):兔胰腺腺泡細(xì)胞
組織來(lái)源:胰腺
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):短梭形,,多角形
傳代特性:不增殖,;不傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔胰腺腺泡細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔胰腺腺泡采用膠原酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔胰腺腺泡經(jīng)亞甲基藍(lán)染色檢測(cè),,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過(guò)夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi),;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
胃粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | 白介素-17抗體 |
酸乙轉(zhuǎn)移酶2抗體 | 表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體 |
胚胎干細(xì)胞相關(guān)蛋白FOPNL抗體 | 褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體 |
核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 | 接頭蛋白DOK7抗體 |
20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框173抗體 | 麻疹病毒血凝素抗體 |
F7 Others Human 人 F7 / Coagulation Factor VII 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌耐藥細(xì)胞株 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1022 |
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92] | TGFBR3 Others Mouse 小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HBMEC) ( 5×105 ) 大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 細(xì)胞名稱(chēng) | CD226 Others Rat 大鼠 CD226 / DNAM-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
POSTN Others Mouse 小鼠 POSTN / OSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | B16細(xì)胞,,小鼠黑色素瘤細(xì)胞 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,LTEP-sm細(xì)胞 角膜內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
CM-R057大鼠腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 兔胰腺腺泡原代細(xì)胞褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體 |
RBL-2H3細(xì)胞,白血病細(xì)胞 永生化鼻咽上皮細(xì)胞系,NP69-SV40T細(xì)胞 CL-0232TF-1(人血液白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 人卵巢表層上皮細(xì)胞HOSEpiC |
CM-R048大鼠腸巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | CST6 Others Mouse 小鼠 Cystatin E / CST6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
TNFRSF1A Others Human 人 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框68抗體 |
白細(xì)胞衍生化學(xué)吸引素抗體 | HIBEpiC細(xì)胞,,人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞,HFTF細(xì)胞 猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1 |
Bcl2樣凋亡蛋白9抗體 | 癌/抗原58抗體 |
谷受體δ2/GluR-δ2抗體 | F7 Others Human 人 F7 / Coagulation Factor VII 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |