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詳細介紹
兔胰島原代細胞
兔胰島細胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分,。外分泌腺由腺泡和腺管組成,，腺泡分泌胰液,，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,，有消化蛋白質,、脂肪和糖的作用,。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞,、β細胞,、γ細胞及PP細胞,。α細胞分泌胰高血糖素,，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖,；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α,、β細胞的分泌,；PP細胞分泌胰多肽,，抑制胃腸運動,、胰液分泌和膽囊收縮。胰島細胞作為糖尿病新藥的細胞篩選模型需保持其結構完整,、生理功能穩(wěn)定和足夠長的存活時間,。胰島占胰腺總質量的1%-2%，每個胰島大概含有1000個細胞,。胰島移植可消除常規(guī)治療產生的嚴重低血糖癥狀,，具有創(chuàng)傷小及并發(fā)癥少等優(yōu)點，是有前景的Ⅰ型糖尿病治療方案,。移植胰島的獲得需經過供體篩選,、胰腺消化、胰島分離純化及結果鑒定等步驟,，分離純化效果取決于原料及操作方法的選擇,。
英文名稱 | Rabbit Pancreatic Islet Cells | 組織來源 | 胰腺 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7875 |
細胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：兔胰島細胞
組織來源：胰腺
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：梭形,、多角形
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
兔胰島細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的兔胰島采用膠原酶灌注消化法結合密度梯度離心法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
實驗室分離的兔胰島經DTZ染色檢測,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
PG-LH7細胞,，人肺巨細胞癌(PG)的低轉移亞系 小鼠胚成纖維包裝細胞,ψ2細胞 CL-0026ARPE-19(人視網膜上皮細胞)5×106cells/瓶×2 | 骨堿性酸酶抗體 |
RAS相關GTP結合蛋白A抗體 | 細胞分化周期CDC42蛋白抗體 |
酸化組蛋白去乙?；?span>4(Ser246)抗體 | 膽汁酸受體抗體 |
少突細胞髓0脂糖蛋白抗體 | 扭轉原腸胚形成同源蛋白1抗體 |
鋅指蛋白148抗體 | 肌微管素1抗體 |
ST(豬細胞) 5×106cells/瓶×2 | mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 |
人口腔表皮樣癌細胞;KB 大鼠尿道上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化) |
大鼠周成纖維細胞RPNF | 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184 |
大鼠肝細胞;BRL | CL-0191RBE(人膽管癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
NCI-H520[H520]細胞，人肺癌細胞 人膀胱癌細胞,EJ細胞 人心肌細胞HCM | 兔胰島原代細胞膽汁酸受體抗體 |
肝動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | HSF人皮膚成纖維細胞 HSF in human skin fibroblasts DMEM+10%FBS或者(進口的新生牛血清NCS) |
ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM2 / CD102 人細胞裂解液 (陽性對照) | IL27 Protein Mouse 重組小鼠 IL27 / Ierleukin-27 蛋白 (His 標簽) |
星形細胞生長添加物AGS | 原活化蛋白激酶組織蛋白1抗體 |
防御素β2抗體 | 人腎皮質上皮細胞裂解物HRCEpiCL |
異染色質蛋白1-γ抗體 | 白細胞介素-12受體β1抗體 |
卡波西氏肉瘤皰疹潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 | ST(豬細胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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