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詳細(xì)介紹
兔羊膜間質(zhì)原代細(xì)胞
兔羊膜間質(zhì)細(xì)胞分離自胎盤組織,；胎盤（placenta）是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜,、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成,。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性,。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官,。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層,，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,，含有眼表上皮細(xì)胞，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì),，其光滑,，無血管、及淋巴,，具有一定的彈性,；在電鏡下，其分為五層：上皮層,、基底膜,、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層,，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,，主要為Ⅰ、Ⅲ,、Ⅳ,、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白,、層粘連蛋白等成份,。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成，均具有多分化潛能,，可轉(zhuǎn)化為元,，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和營養(yǎng)因子的功能,。
英文名稱 | Rabbit Amniotic Mesenchymal Cells | 組織來源 | 胎盤組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7175 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔羊膜間質(zhì)細(xì)胞
組織來源：胎盤組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔羊膜間質(zhì)采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔羊膜間質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
B16F1細(xì)胞，小鼠黑色素瘤細(xì)胞 MRC-5(胚肺細(xì)胞) Asp2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞;FC33 | 骨骼肌烯醇化酶抗體 |
RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 | 細(xì)胞毒性受體NK-p80抗體 |
酸化組蛋白去乙?；?span>2抗體 | 膽鹽激活脂肪酶抗體 |
少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子2抗體 | 扭轉(zhuǎn)蛋白A抗體 |
鋅指蛋白144抗體 | 肌酸酸激酶2抗體 |
CCL6 Protein Mouse 重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標(biāo)簽) | HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 |
M17細(xì)胞,，母細(xì)胞瘤細(xì)胞 非雄激素依賴型前列腺癌細(xì)胞,Tsu-Prl細(xì)胞 人束膜細(xì)胞RNAHPC miRNA5 μg | 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO |
大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞RM | HuT 78(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人腎管狀上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CLCF1 Protein Human 重組人 N1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
JEG-3細(xì)胞，人絨癌細(xì)胞 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞,DCS細(xì)胞 人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞HCAEC | 兔羊膜間質(zhì)原代細(xì)胞膽鹽激活脂肪酶抗體 |
Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 小鼠背部脊髓元(MN-dsc)(1×106) |
MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系 牛胚氣管細(xì)胞,EB細(xì)胞 Hs 578T(人成纖維細(xì)胞) | 球狀少突細(xì)胞培養(yǎng)基OsM |
T-104AII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL | 原活化蛋白激酶酸酶-2抗體 |
防御素α6抗體 | 細(xì)胞名稱 |
異染色體同源蛋白1抗體 | 白細(xì)胞介素-10受體a抗體 |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD8抗體 | CCL6 Protein Mouse 重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
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