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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔牙髓干采用膠原酶消化法,、低密度稀釋克隆制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔牙髓干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 兔牙髓干原代細胞 | 組織來源 | 牙髓 |
英文名稱 | Rabbit Dental Pulp Stem Cells | 貨號 | YS-01X8141 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔牙髓干細胞分離自牙髓組織,；牙髓組織位于牙齒內(nèi)部的牙髓腔內(nèi)。牙髓腔的外形與牙體形態(tài)大致相似,，牙冠部髓腔較大,，稱髓室，牙根部髓腔較細小,，稱根管,，根尖部有小孔，稱根尖孔,。牙髓組織主要包含,、血管，淋巴和結(jié)締組織,，還有排列在牙髓外周的造牙本質(zhì)細胞,，其作用是造牙本質(zhì)。牙髓因受到病源刺激物的作用不同以及機體抵抗力的差異,，出現(xiàn)不同的病理變化,，在臨床上會表現(xiàn)為一系列不同的癥狀和體征。牙髓充血狀況持續(xù)時間較長后,，轉(zhuǎn)化為急性牙髓炎癥,。間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells，MSCs)來源于胚胎時期的中胚層組織,，具有很強的自我復(fù)制和多向分化潛能,，具有向脂肪細胞、成骨細胞,、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力,，運用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景，目前已能夠從骨髓,、脂肪,、滑膜、骨骼,、肌肉等組織以及羊水,、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細胞,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
兔牙髓干細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
細胞 | 白介素4抗體 |
早老素蛋白1+2抗體 | 補體因子B抗體 |
叉頭蛋白D4 | 有絲分裂驅(qū)動蛋白樣1抗體 |
單核細胞趨化蛋白5抗體 | 蛋白多糖3抗體 |
20號染色體開放閱讀框79抗體 | 心臟和嵴衍生蛋白2抗體 |
TSLP Others Mouse 小鼠 TSLP 人細胞裂解液 (陽性對照) | NEGR1 Others Mouse 小鼠 NEGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H2087 | 人表皮淋巴內(nèi)管皮細胞(HDLEC)(5×105) |
4T1(小鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H067人腎系膜細胞培養(yǎng)基100mL 人心肝成纖維細胞RNAHCF miRNA5 μg | XCL1 Others Canine 狗 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
Promocell C-23110 Fibroblast Growth Medium KIT,成纖維細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml | NHEM.f Pellet 正常人表皮黑素細胞團塊(少年者) > 1 mio.cells 人腸平滑肌細胞裂解物HISMCL |
CM-R071大鼠輸尿管上皮細胞培養(yǎng)基100mL | 兔牙髓干原代細胞有絲分裂驅(qū)動蛋白樣1抗體 |
人腦瘤細胞;SF17 大鼠肝竇內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 小鼠淋巴瘤細胞;EL4 |
TNFSF12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S5 腎透明細胞腺癌,，786-0細胞 A-375 [A375](惡性黑色素瘤細胞) |
CD83 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD83 人細胞裂解液 (陽性對照) | 促進凋亡基因抗體 |
T淋巴細胞易位蛋白2抗體 | ACVR1 Others Human 人 ALK-2 / ACVR1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白12抗體 | 核仁蛋白3抗體 |
膠質(zhì)源性連接蛋白抗體 | TSLP Others Mouse 小鼠 TSLP 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次,，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
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