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兔小氣道平滑肌原代細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-05-19 13:14:08瀏覽次數(shù):50

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X8455 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
兔小氣道平滑肌原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代小腦顆粒細(xì)胞 HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞) MG-63 人成骨肉瘤細(xì)胞 1ml/T75 LCC1 人癌細(xì)胞 Hep G2 人肝癌細(xì)胞 小鼠原代腦成纖維細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
細(xì)胞屬性:

兔小氣道平滑肌原代細(xì)胞

方法簡介

實(shí)驗(yàn)室分離的兔小氣道平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實(shí)驗(yàn)室分離的兔小氣道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

產(chǎn)品名稱

兔小氣道平滑肌原代細(xì)胞

組織來源

小氣道

英文名稱

Rabbit Small   Airway Smooth Muscle Cells

貨號(hào)

YS-01X8455

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

兔小氣道平滑肌原代細(xì)胞
細(xì)胞簡介:

兔小氣道平滑肌細(xì)胞分離自小氣道組織,;臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細(xì)支氣管稱為小氣道。小氣道具有氣流阻力小,,但易阻塞的特點(diǎn),。在平靜吸氣時(shí),空氣進(jìn)入狹窄的鼻咽部,,產(chǎn)生渦流,。由于小氣道已無軟骨支持,在脫離纖維鞘嵌入肺組織后,,管腔通暢性不象軟骨性氣道,,易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細(xì)胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層,,作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用,。小氣道位于肺泡和氣管的交界處,這些細(xì)胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應(yīng),、產(chǎn)生化學(xué)因子進(jìn)行宿主防御,、表達(dá)粘附分子,并可能通過HLA-DR表達(dá)呈遞抗原,;它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡,。許多呼吸道疾病,如哮喘,、支氣管炎,、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化,都涉及呼吸道表面上皮細(xì)胞的破壞,;小氣道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴(kuò)增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,核卵圓形、居中,;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏,;細(xì)胞密度低時(shí),,常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn),。小氣道的生理功能特點(diǎn):①小氣道阻力小,;②氣流速度慢,;③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例。小氣管平滑肌細(xì)胞主要功能:①保持氣道張力維持小氣道形態(tài),;②肺小氣道進(jìn)行氣體交換,,病變可引起換氣功能障礙;③炎癥,、痰液阻塞或當(dāng)氣道外壓大于氣道內(nèi)壓時(shí)容易造成小氣道閉合,、萎陷。小氣管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①支氣管炎,;②肺氣腫,;③慢性阻塞性肺疾病。

培養(yǎng)信息:

兔小氣道平滑肌原代細(xì)胞

培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,含FBS,、EGFbFGF,、Insulin,、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO25%

兔小氣道平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

兔小氣道平滑肌原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

兔小氣道平滑肌原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;

④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

公司產(chǎn)品:兔小氣道平滑肌原代細(xì)胞

小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1

胰島素受體底物-1抗體

旁瘤抗原MA1抗體

碳酸酶6抗體

細(xì)胞外基質(zhì)蛋白FREM1抗體

甲基單克隆抗體

巨噬細(xì)胞炎性蛋白16抗體

尤文氏肉瘤相關(guān)EWS蛋白抗體

C2CD3蛋白抗體

艾滋病病毒p55抗體

PTPN12 Others Human PTPN12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素   (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞HPAF

HA Others H10N3 甲型流感 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

293T(人胚腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H051人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞RNAHBdSF miRNA5 μg

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素   (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CHST3 Others Mouse 小鼠 CHST3 / C6ST-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

3D4/21豬肺泡巨噬細(xì)胞   Porcine alveolar macrophage 3D4/21 1640+10% FBS+0.1mM NEAA+1mM

CM-R087大鼠軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

兔小氣道平滑肌原代細(xì)胞甲基單克隆抗體

SiHa細(xì)胞,,子細(xì)胞 人鼻咽癌母系細(xì)胞,CNE-2Z細(xì)胞 CL-0240V79(倉鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞HLEC

CM-H120人元細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

DPEP2 Others Human DPEP2 / MBD-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

KLK4 Others Human KLK-4 / Kallikrein-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

2號(hào)染色體開放閱讀框42抗體

酸化富亮重復(fù)激酶2抗體

MOLT-4細(xì)胞,急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞 髓性甲狀腺癌細(xì)胞,TT細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(傣族);KM9403

殺菌通透性增加蛋白樣1抗體

胞質(zhì)5'核苷酸酶1A抗體

酸化G蛋白通路抑制蛋白1抗體

PTPN12 Others Human PTPN12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

 


操作步驟:

兔小氣道平滑肌原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min,。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),,PBS沖洗3次,每次3min,。

5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,每次3min,。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,,每次3min,。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。

11. 鏡檢觀察,。



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