詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,!
細胞屬性:
方法簡介
實驗室分離的兔外周血淋巴采用取外周血,、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為1×106cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔外周血淋巴經(jīng)過檢測,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 兔外周血淋巴原代細胞 | 組織來源 | 外周血 |
英文名稱 | Rabbit Peripheral Blood Lymphocyte Cells | 貨號 | YS-01X8444 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介:
兔外周血淋巴細胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念,。淋巴細胞(lymphocyte)是白細胞的一種,是體積小的白細胞,。其由淋巴器官產(chǎn)生,,主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中,是機體免疫應(yīng)答功能的重要細胞成分,,是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者,,是對抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細胞變異的一線“士兵"。淋巴細胞是一類具有免疫識別功能的細胞系,按其發(fā)生遷移,、表面分子和功能的不同,,可分為T淋巴細胞(又名T細胞)、B淋巴細胞(又名B細胞)和自然殺傷(NK)細胞,。T細胞和B細胞都是抗原特異性淋巴細胞,,它們的初來源是相同的,都來自造血組織,。T淋巴細胞隨血循環(huán)到胸腺,,在胸腺激素等的作用下成熟,而B細胞在骨髓中分化成熟,。當(dāng)受抗原刺激后,,T淋巴細胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細胞,再分化為致敏T淋巴細胞,,參與細胞免疫,,其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染、瘤細胞與異體細胞等,;而B淋巴細胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細胞,,再分化為漿細胞,產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白(抗體),,參與體液免疫,,其功能是產(chǎn)生抗體,提呈抗原,,以及分泌細胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié),;NK細胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細胞毒效應(yīng),具有殺傷靶細胞的作用,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細胞形態(tài):圓形
傳代特性:不增殖,;不傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔外周血淋巴細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),,PBS沖洗3次,,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,,每次3min,。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍,。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),,以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品:
小氣道上皮細胞培養(yǎng)基SAEpiCM | 白介素7抗體 |
蛋白質(zhì)酸酶2調(diào)節(jié)亞基5D/PP2A-B56-δ抗體 | L型電壓依賴型鈣通道β3(L-type Ca++ CPβ3)抗體 |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體 | 酸化雙微體2癌基因抗體 |
CD72蛋白抗體 | EYA4蛋白抗體 |
白細胞抗原CD97 alpha 抗體 | 熱休克蛋白56抗體 |
CLEC10A Others Human 人 CLEC10A / MGL1 / CD301 人細胞裂解液 (陽性對照) | WL1(大鼠肺細胞) 5×106cells/瓶×2 原代肝實質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml |
人肺動脈平滑肌細胞總RNAHPASMC NA | PLA2G2E Others Mouse 小鼠 PLA2G2E 人細胞裂解液 (陽性對照) |
293A (人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H035人腸靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL 人支氣管上皮細胞RNAHBEpiC miRNA5 μg | CHST11 Others Human 人 CHST11 / C4ST-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM0501 人滑膜細胞培養(yǎng)基 100mL | SMPD1 Others Human 人 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-R103大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL | 兔外周血淋巴原代細胞酸化雙微體2癌基因抗體 |
HAVCR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照) | EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽) |
人Burkkit淋巴瘤細胞;Daudi | PDGFC Others Human 人 PDGF-C 人細胞裂解液 (陽性對照) |
獼猴皮膚細胞;MMS4 人軟組織纖維瘤細胞,,TE 115.T細胞 Eca-109(食管癌細胞) | 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 |
LIN7C蛋白抗體 | HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
腦蛋白44樣蛋白抗體 | 軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體 |
腦腸肽抗體 | CLEC10A Others Human 人 CLEC10A / MGL1 / CD301 人細胞裂解液 (陽性對照) |