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兔外周血單核原代細胞

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更新時間:2025-05-18 16:58:22瀏覽次數(shù):80

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X8442 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
兔外周血單核原代細胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代腎上腺皮質(zhì)細胞 CT26.WT(小鼠結(jié)腸癌細胞) U937(U-937) 人組織細胞淋巴瘤細胞 1ml/T75 Huh-7 人肝癌細胞 801-D 人大細胞肺癌細胞 小鼠原代全骨髓細胞

詳細介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

兔外周血單核原代細胞

方法簡介

實驗室分離的兔外周血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

產(chǎn)品名稱

兔外周血單核原代細胞

組織來源

外周血

英文名稱

Rabbit Peripheral Blood Monocyte Cells

貨號

YS-01X8442

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

細胞簡介:

兔外周血單核細胞分離自外周血,;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念,。單核細胞起源于骨髓中的造血干細胞,,并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細胞,。與其他血細胞比較,,單核細胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶,并且具有更強的吞噬作用,。單核細胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中,,細胞體積繼續(xù)增大,直徑可達50-80μm,,細胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多,,成為成熟的細胞。固定在組織中的單核細胞稱為組織巨噬細胞,,它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié),、肺泡壁、骨髓,、肝和脾等器官,。激活了的單核細胞和組織巨噬細胞能生成并釋放多種細胞毒、干擾素和白細胞介素,,參與機體防衛(wèi)機制,還產(chǎn)生一些能促進內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞生長的因子,。在炎癥周圍單核細胞能進行細胞分裂,,并包圍異物。

兔外周血單核原代細胞

培養(yǎng)信息:

兔外周血單核原代細胞

培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細胞形態(tài):圓形,、巨噬細胞樣

傳代特性:不增殖,;不傳代

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

兔外周血單核細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

兔外周血單核原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

兔外周血單核原代細胞

1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;

②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;

③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2,、細胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基。

3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞,;

④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

操作步驟:

兔外周血單核原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min,。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),,PBS沖洗3次,每次3min,。

5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,每次3min,。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,,每次3min,。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍,。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),,以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察,。

公司產(chǎn)品:兔外周血單核原代細胞


KYSE30細胞,,人食管鱗癌 人膠質(zhì)母細胞瘤細胞,A172細胞 山羊皮膚細胞;WGS1

谷甘肽S轉(zhuǎn)移酶κ抗體

ras癌基因家族Rab5蛋白抗體

細胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體

酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體

單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白2抗體

上皮離子通道蛋白γ抗體

(II)激活肽1抗體

心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體

肌球蛋白結(jié)合蛋白C抗體

CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細胞) 5×106cells/瓶×2

615小鼠癌瘤株;Ca759

L-02細胞,,正常人肝細胞 人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株,7WML6.0細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA

LLC(小鼠肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠表皮角化細胞培養(yǎng)基 100mL

IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白

CM-R122大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞培養(yǎng)基100mL

兔源細胞

P3X63Ag8小鼠骨髓瘤細胞 Mouse myeloma cell line P3X63Ag8 DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

兔外周血單核原代細胞單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白2抗體

人張氏肝細胞;Chang liver

EDNRB Others Human 人 EDNRB / Endothelin B Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照)

RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞 ICPB 7[C-1;ICMP 8639;NCPPB 2626]細胞 CGM1(EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞)

小鼠膀胱成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-7

原活化蛋白激酶13抗體

芳基硫酸酯酶A抗體

HuH-7人肝癌細胞 Human

乙酰化組蛋白H1b抗體

白介素31受體a抗體

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白69抗體

CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細胞) 5×106cells/瓶×2

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