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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔外周血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 兔外周血單核原代細胞 | 組織來源 | 外周血 |
英文名稱 | Rabbit Peripheral Blood Monocyte Cells | 貨號 | YS-01X8442 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔外周血單核細胞分離自外周血,；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,，再在從血液中提取分離得到造血干細胞,，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念,。單核細胞起源于骨髓中的造血干細胞,，并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細胞,。與其他血細胞比較,，單核細胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強的吞噬作用,。單核細胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中,，細胞體積繼續(xù)增大，直徑可達50-80μm,，細胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多,，成為成熟的細胞。固定在組織中的單核細胞稱為組織巨噬細胞,，它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié),、肺泡壁、骨髓,、肝和脾等器官,。激活了的單核細胞和組織巨噬細胞能生成并釋放多種細胞毒、干擾素和白細胞介素,，參與機體防衛(wèi)機制，還產(chǎn)生一些能促進內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞生長的因子,。在炎癥周圍單核細胞能進行細胞分裂,，并包圍異物。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：半貼壁半懸浮
細胞形態(tài)：圓形,、巨噬細胞樣
傳代特性：不增殖,；不傳代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔外周血單核細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品：
KYSE30細胞,，人食管鱗癌 人膠質(zhì)母細胞瘤細胞,A172細胞 山羊皮膚細胞;WGS1 | 谷甘肽S轉(zhuǎn)移酶κ抗體 |
ras癌基因家族Rab5蛋白抗體 | 細胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體 |
酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 | 單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 |
上皮離子通道蛋白γ抗體 | (II)激活肽1抗體 |
心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體 | 肌球蛋白結(jié)合蛋白C抗體 |
CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 | 615小鼠癌瘤株;Ca759 |
L-02細胞,，正常人肝細胞 人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株,7WML6.0細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA | LLC(小鼠肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
小鼠表皮角化細胞培養(yǎng)基 100mL | IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 |
CM-R122大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞培養(yǎng)基100mL | 兔源細胞 |
P3X63Ag8小鼠骨髓瘤細胞 Mouse myeloma cell line P3X63Ag8 DMEM培養(yǎng)基+10%FBS | 兔外周血單核原代細胞單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 |
人張氏肝細胞;Chang liver | EDNRB Others Human 人 EDNRB / Endothelin B Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) |
RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞 ICPB 7[C-1;ICMP 8639;NCPPB 2626]細胞 CGM1(EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞) | 小鼠膀胱成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL |
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-7 | 原活化蛋白激酶13抗體 |
芳基硫酸酯酶A抗體 | HuH-7人肝癌細胞 Human |
乙酰化組蛋白H1b抗體 | 白介素31受體a抗體 |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白69抗體 | CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 |
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