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詳細(xì)介紹
兔外周血白原代細(xì)胞?細(xì)胞
兔外周血白細(xì)胞分離自外周血,；外周血是除骨髓之外的血液,，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱(chēng)為外周血干細(xì)胞,，在二十一世紀(jì)初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。白細(xì)胞是一類(lèi)無(wú)色,、球形,、有核的血細(xì)胞。白細(xì)胞不是一個(gè)均一的細(xì)胞群,，根據(jù)其形態(tài),、功能和來(lái)源部位可以分為三大類(lèi)：粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,，其中粒細(xì)胞又可根據(jù)胞質(zhì)中顆粒的染色性質(zhì)不同,，分為粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞三種,。根據(jù)白細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無(wú)特殊顆粒,，可將其分為有粒白細(xì)胞和無(wú)粒白細(xì)胞。前者常簡(jiǎn)稱(chēng)為粒細(xì)胞,，根據(jù)其特殊顆粒的染色特性,，又分為粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞,，白細(xì)胞也通常被稱(chēng)為免疫細(xì)胞,。在顯微鏡下可以看到，血細(xì)胞中體積比較大,、數(shù)量比較少,，具有細(xì)胞核；其主要作用是吞噬細(xì)菌,、防御疾病,。
英文名稱(chēng) | Rabbit Peripheral Blood Leukocyte Cells | 組織來(lái)源 | 血液組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7196 |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱(chēng)：兔外周血白細(xì)胞
組織來(lái)源：血液組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
兔外周血白細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用公司
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血白采用取外周血,、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血白經(jīng)過(guò)檢測(cè),，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
人類(lèi)原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7 大鼠膀胱上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 谷甘肽S轉(zhuǎn)移酶θ抗體 |
ras癌基因家族Rab3a抗體 | 細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體 |
酸化轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體 | 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 |
上皮離子通道蛋白D/δENaC抗體 | 凝溶膠蛋白抗體 |
心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體 | 肌球蛋白XVIIIb抗體 |
LM-8 小鼠骨肉瘤 | 犬源細(xì)胞 |
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1 小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞 其它 |
馬間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪HMSC-ad | 豬小腸上皮細(xì)胞;ZYM-DIEC02 |
BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細(xì)胞株 | CL-0175OK(負(fù)鼠腎小管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
C2C12細(xì)胞,，人肌肉成纖維細(xì)胞瘤 人腎癌細(xì)胞系,ACHN細(xì)胞 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞HPMEC | 兔外周血白原代細(xì)胞單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 |
肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基AEpiCM | tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類(lèi));P19-CAG-tTA-3C3 彈(含100mL酶解緩沖液) 10mL |
SERPINF1 Others Human 人 SerpinF1 / SERPINF1 / PEDF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
CL-0225SW620(人結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 原活化蛋白激酶1/2抗體 |
芳基磺基轉(zhuǎn)移酶1抗體 | 人腎近曲小管上皮細(xì)胞RNAHRPTEpiC miRNA5 μg |
乙酰化和酸化組蛋白H3抗體 | 白介素2受體γ鏈抗體 |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白68抗體(皮膚T淋巴細(xì)胞淋巴瘤相關(guān)抗原) | LM-8 小鼠骨肉瘤 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi),；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
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