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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔胎盤羊膜采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔胎盤羊膜經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔胎盤羊膜原代細胞 | 組織來源 | 胎盤 |
英文名稱 | Rabbit Placental Amniotic Cells | 貨號 | YS-01X8440 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔胎盤羊膜細胞分離自胎盤組織,；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成,。胎兒在子宮中發(fā)育,，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿浴ＬケP還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,，是一個重要的內(nèi)分泌器官,。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤,。羊膜是胎盤的內(nèi)層,，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細胞,，包括結(jié)膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質(zhì),，其光滑，無血管,、及淋巴,，具有一定的彈性；在電鏡下,，其分為五層：上皮層,、基底膜、致密層,、纖維母細胞層和海綿層,，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ,、Ⅲ,、Ⅳ、Ⅴ,、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白,、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質(zhì)細胞組成,，均具有多分化潛能,，可轉(zhuǎn)化為元，且還有合成,、釋放生物活性物質(zhì)和營養(yǎng)因子的功能,。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：梭形、多角形
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔胎盤羊膜細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品：
Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)小鼠肝癌細胞 Hepa1-6-EGFP (CMV-GFP leiviral consuct stable sain) of hepatocellular carcinoma cells in mice DMEM+10% FBS | 谷甘肽S轉(zhuǎn)移酶θ2抗體 |
ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗體 | 細胞表面趨化因子受體4抗體 |
酸化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體 | 單絲蛋白激酶1抗體 |
上皮間質(zhì)相互作用蛋白1抗體 | 凝溶膠蛋白家族Fli-1抗體 |
心肌蘭尼堿受體抗體（腦肌蘭尼堿受體） | 肌球蛋白7a/常染色體隱性耳聾蛋白2抗體 |
TNFSF11 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 蛋白 (Fc 標簽) | MM, 小鼠小膠質(zhì)細胞 |
MDA-MB-157細胞,，癌細胞 人胎盤絨膜癌細胞,BeWo細胞 人肺動脈內(nèi)皮細胞RNAHPASMC miRNA5 μg | 恒河猴腎細胞;MMK2 |
豬角膜上皮細胞PCEpiC | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0919 |
caski | 小鼠腸動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
非洲綠猴腎細胞;BS-C-1 人單核細胞，THP-1細胞 Caco-2(結(jié)腸腺癌細胞) | 兔胎盤羊膜原代細胞單絲蛋白激酶1抗體 |
GPL1 豚鼠肺成纖維樣細胞 | CLU Others Human 人 CLU / Clusterin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
IGFBP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP3 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-M012小鼠肺動脈成纖維細胞培養(yǎng)基100mL |
人膀胱癌細胞;5637(HTB-9) | 絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體 |
范可尼綜合征相關(guān)蛋白FANCC抗體 | Panc10.05 胰腺腺癌 |
乙?；?/span>P53(Lys382)抗體 | 白介素2受體β鏈抗體 IL-2Rβ |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67抗體 | TNFSF11 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 蛋白 (Fc 標簽) |
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