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詳細介紹
兔胎盤絨毛膜原代細胞
兔胎盤絨毛膜細胞分離自胎盤組織,；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,，由羊膜,、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成,。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),，而雙方保持相當?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官,。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤,。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成,。胚泡植入子宮內(nèi)膜后，在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,，以細胞滋養(yǎng)層為中軸,，外裹合體滋養(yǎng)層,，稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸,，使初級干絨毛變成了次級干絨毛,。當絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織，并與胚體內(nèi)的血管相通時,，次級干絨毛改稱三級干絨毛,。三級干絨毛末端的細胞滋養(yǎng)層細胞形成細胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育,，叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤,，而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。
英文名稱 | Rabbit Placental Chorionic Cells | 組織來源 | 胎盤 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8438 |
細胞形態(tài) | 梭形,、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔胎盤絨毛膜細胞
組織來源：胎盤
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：梭形,、多角形
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔胎盤絨毛膜細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的兔胎盤絨毛膜采用-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔胎盤絨毛膜經(jīng)hCG免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
RCC-krause細胞，腎癌細胞 人細胞,CaSKi細胞 人內(nèi)根殼細胞總RNAHHIRSC NA | 谷甘肽S轉(zhuǎn)移酶ζ1抗體 |
ras癌基因家族Rab2抗體 | 細胞表面趨化因子受體3抗體 |
酸化轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體 | 單絲蛋白激酶1+2抗體 |
上皮鈣粘附分子抗體 | 凝集胎盤蛋白1抗體 |
心肌肌球蛋白抗體（α-myosin） | 肌強直性營養(yǎng)不良蛋白激酶抗體 |
非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4- | COLO320/DM 人結(jié)腸癌細胞 |
HCT 116人結(jié)腸癌細胞 HCT 116 human colon cancer cells MycCoy's 5A+10%FBS | TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽) |
內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基ECM | HKC(人胚腎上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 |
原代肝實質(zhì)細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml | OSM Protein Mouse 重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 |
PC-3M 2B4細胞,，人前列腺癌細胞高轉(zhuǎn)移亞系 小鼠原B細胞株,BaF3細胞 人腸平滑肌細胞HISMC | 兔胎盤絨毛膜原代細胞單絲蛋白激酶1+2抗體 |
細胞 | F13B Others Human 人 F13B / Coagulation factor XIII B chain 人細胞裂解液 (陽性對照) |
MOLT-4細胞,，人急性T淋巴母細胞白血病細胞 大鼠卵巢癌細胞株,NUTU-19細胞 人外根殼細胞cDNAHHORSC cDNA | 軟骨細胞培養(yǎng)基CM |
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1 | 絲抑制蛋白激酶C底物抗體 |
范可尼綜合征相關(guān)蛋白FAN1抗體 | 人腦血管平滑肌細胞 |
乙酰肝素酶抗體 | 白介素2受體a鏈抗體 IL-2Ra |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白65抗體 | 非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4- |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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