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詳細介紹
兔腎臟巨噬原代細胞
兔腎臟巨噬細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液,，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì),、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、等,，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡,。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,，生成腎素、促紅細胞生成素,、活性D3,、前列腺素,、激肽等,，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,，使新陳代謝得以正常進行。巨噬細胞屬免疫細胞,，有多種功能,，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象,。巨噬細胞較易獲得,，便于培養(yǎng)，并可進行純化,。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng),，難以長期生存,。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細胞,，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞,。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫),。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應(yīng),。
英文名稱 | Rabbit Renal Macrophage Cells | 組織來源 | 腎 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8431 |
細胞形態(tài) | 巨噬細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔腎臟巨噬細胞
組織來源：腎
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：巨噬細胞樣
傳代特性：屬于終末分化細胞,；屬于不增殖細胞群
消化液：（12mM）
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
兔腎臟巨噬細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的兔腎臟巨噬采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔腎臟巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49) | 脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF2抗體 |
G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1 | 載脂蛋白C3抗體 |
二酸腺苷核糖基化因子核苷酸交換因子2抗體 | 微管相關(guān)蛋白FAM82B抗體 |
血管緊張素III抗體 | 脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF2抗體 |
微管相關(guān)蛋白FAM82B抗體 | 載脂蛋白C3抗體 |
人脂肪細胞-內(nèi)臟(HPA-v)(1×106 ) | IL20RA Others Human 人 IL20Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人肺微血管內(nèi)皮細胞cDNAHPMEC cDNA | GSK3B Others Mouse 小鼠 GSK3B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
hCD133+-CB-c single donor 從臍帶血提取的人類CD133+祖細胞(hCD133+-CB),，單一捐獻者 100000 大鼠垂體細胞RPC | PPT1 Others Human 人 PPT1 / Palmitoyl-protein thioesterase 1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人心肌細胞 (HCMa) (1×106 ) RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞 Mouse | GSK3B Others Human 人 GSK3B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CSC, 小鼠心肌細胞 | 兔腎臟巨噬原代細胞微管相關(guān)蛋白FAM82B抗體 |
CLCF1 Others Human 人 N1 / CLCF1 / CLC 人細胞裂解液 (陽性對照) | 615小鼠癌瘤株;Ca763 |
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株;7WCY1.0 | PDCD1 Others Human 人 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SW 982 [SW-982, SW982]人滑膜肉瘤細胞 SW 982 [SW-982, SW982] human synovial sarcoma cells L-15(GIBCO)+10%FBS | 濾泡型轉(zhuǎn)運蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗體 |
血管緊張素III抗體 | FCER1A Others Human 人 FcERI / FCER1A 人細胞裂解液 (陽性對照) |
G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1 | 二酸腺苷核糖基化因子核苷酸交換因子2抗體 |
濾泡型轉(zhuǎn)運蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗體 | 人脂肪細胞-內(nèi)臟(HPA-v)(1×106 ) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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