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本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔腎上腺皮質(zhì)采用膠原酶消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔腎上腺皮質(zhì)經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔腎上腺皮質(zhì)原代細胞 | 組織來源 | 腎上腺 |
英文名稱 | Rabbit Adrenal Cortical Cells | 貨號 | YS-01X8140 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔腎上腺皮質(zhì)細胞分離自腎上腺組織,；腎上腺是機體相當重要的內(nèi)分泌器官,，由于位于兩側(cè)腎臟的上方，故名腎上腺,。腎上腺左右各一,，位于腎的上方，共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹,。左腎上腺呈半月形,，右腎上腺為三角形。從側(cè)面觀察,，腺體分腎上腺皮質(zhì)和腎上腺髓質(zhì)兩部分,，周圍部分是皮質(zhì)，內(nèi)部是髓質(zhì),。腎上腺內(nèi)部是髓質(zhì)部分,，分泌腎上腺素和,。這些激素在應激狀態(tài)釋放增多，能夠幫助升高血壓,，加快心率,，升高血糖，動員全身的儲備物質(zhì),，為機體與外界環(huán)境的抗爭作好充分準備,。腎上腺外部是皮質(zhì)部分，分泌醛固酮,、和少量的雌雄激素,。醛固酮能夠促進小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收，正常數(shù)量的醛固酮,，對維持機體正常血壓有重要作用,。但是如果過多分泌，會導致高血壓和低血鉀,。是機體必需的激素之一,。當機體處于應激狀態(tài)時，比如感冒,，發(fā)燒,，遇到突發(fā)事件的時候，腎上腺皮質(zhì)分泌大量的,，這些能夠動員機體的存儲能源,，為應對內(nèi)部或者外部重要事件提供充分的物質(zhì)準備。當缺乏時,，機體在遇到重大事件的時候,，往往缺乏足夠應對能力，容易被病毒或外界壓力所擊倒,。腎上腺產(chǎn)生的雄激素,，對雄性來講，并非,，但是對雌性而言,，是雄激素的一個重要來源。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：梭形,、多角形
傳代特性：可傳1-3代左右,；2代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2,，5%
兔腎上腺皮質(zhì)細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次,，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
小鼠成纖維細胞;φ2 | GATA結(jié)合蛋白2伴侶蛋白抗體 |
葡萄糖6-N-乙?；D(zhuǎn)移酶1抗體 | 自噬相關基因AMBRA1抗體 |
Allgrove綜合征相關蛋白抗體 | FAS凋亡抑制分子2 |
腺苷酸環(huán)化酶4抗體 | GATA結(jié)合蛋白2伴侶蛋白抗體 |
FAS凋亡抑制分子2 | 自噬相關基因AMBRA1抗體 |
17. 脂肪細胞系統(tǒng) | APP Others Human 人 APP / Protease nexin-II 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人肺微血管內(nèi)皮細胞裂解物HPMECL | XPNPEP2 Others Human 人 XPNPEP2 / X-Pro aminopeptidase 2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CD8A Others Mouse 小鼠 CD8a / Lyt2 人細胞裂解液 (陽性對照) | MMGT1 Others Human 人 MMGT1 / EMC5 人細胞裂解液 (陽性對照) |
H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0344HAN(人羊膜細胞)5×106cells/瓶×2 牛腎細胞;MDBK | CD8B Others Human 人 CD8B / P37 / LEU2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞(傣族);KM9403 | 兔腎上腺皮質(zhì)原代細胞FAS凋亡抑制分子2 |
ADM Others Human 人 ADM / Adrenomedullin 人細胞裂解液 (陽性對照) | H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
犬胸腺細胞;cf2Th | U14(小鼠子細胞) 5×106cells/瓶×2 HPAC(人胰腺癌細胞) |
NCI-H446細胞,，小細胞肺癌 人血液白血病細胞,TF-1細胞 人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移細胞株;PG-BE1 | 卷曲蛋白FZD7抗體 |
腺苷酸環(huán)化酶4抗體 | IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) |
葡萄糖6-N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體 | Allgrove綜合征相關蛋白抗體 |
卷曲蛋白FZD7抗體 | 17. 脂肪細胞系統(tǒng) |
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