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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔星形膠質采用酶消化法結合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔星形膠質經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 兔神經(jīng)星形膠質原代細胞 | 組織來源 | 腦 |
英文名稱 | Rabbit Astrocyte Cells | 貨號 | YS-01X8424 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔星形膠質細胞分離自腦組織,；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分,，它是元胞體集中的地方,。內部則是由纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,，即外側面（約占整個皮質面積的1/3）,、內側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂,，溝或裂之間的隆起叫回,，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝,、裂有大腦外側裂,、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,，使大腦皮質組分為額葉,、頂葉、顳葉,、枕葉四大部分,。星形膠質細胞，是哺乳動物腦內分布廣泛的一類細胞,，也是膠質細胞中體積大的一種,。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術（銀染色）顯示此類膠質細胞呈星形，從胞體發(fā)出許多長而分支的突起,，伸展充填在細胞的胞體及其突起之間,，起支持和分隔細胞的作用。細胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足,，有些腳板貼附在鄰近的毛細血管壁上,，因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足，靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內表面,，彼此連接構成膠質界膜,。細胞剛分離時呈圓形，24h后大部分細胞貼壁,，均勻分布于瓶底，部分細胞伸出細小突起,，培養(yǎng)4-5d后細胞數(shù)量明顯增多,，呈扁平、多角形,，胞質豐富且核漿較少,，細胞核呈橢圓形，偏于胞體一側。星形膠質細胞是中樞系統(tǒng)的重要細胞組成,，不僅具有支持功能,，還能夠合成及分泌多種活性物質，在維持元內外環(huán)境,、生存,、遷移、免疫調節(jié),、信號轉導,、軸突生長及功能整合等方面具有重要作用。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：梭形,、多角形
傳代特性：可傳5代左右,；3代以內狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔星形膠質細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
HS-746T細胞,，人胃癌細胞系 人上皮瘤細胞,SK-N-MC細胞 牛胚氣管細胞;EB (NBL-4) | 酸化細胞角蛋白8抗體 |
酸化紅細胞陰離子交換蛋白1抗體 | 轉移生長因子β受體2抗體（TGF-βRⅡ，TGFβRⅡ） |
腫瘤易感性候選基因5抗體 | 酸化熱休克因子1抗體 |
轉化生長因子β活化激酶1 | 酸化細胞角蛋白8抗體 |
酸化熱休克因子1抗體 | 轉移生長因子β受體2抗體（TGF-βRⅡ,，TGFβRⅡ） |
CHO-K1(倉鼠卵巢細胞亞株) 5×106cells/瓶×2 | ES-2 人卵巢透明細胞癌細胞 |
CW-2人結腸腺癌細胞 CW-2 human colon adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | TNFSF13 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 標簽) |
NAMALWA 人Butt`s淋巴瘤細胞 | SERPINF1 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinF1 / PEDF 蛋白 (His 標簽) |
CM-R090大鼠前脂肪細胞培養(yǎng)基100mL | CL-0164NAMALWA(人Butt's淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2 |
MG-63, 人骨肉瘤細胞 | 兔神經(jīng)星形膠質原代細胞酸化熱休克因子1抗體 |
肺大動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | CL-0118HT-29(人結腸癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
INHBA Others Mouse 小鼠 Activin A 人細胞裂解液 (陽性對照) | HFT-8810(人胎兒胸腺細胞株) 5×106cells/瓶×2 |
CM-H040人結腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基100mL | 酸化周期素依賴性激酶5抗體 |
轉化生長因子β活化激酶1 | 人細胞HN |
酸化紅細胞陰離子交換蛋白1抗體 | 腫瘤易感性候選基因5抗體 |
酸化周期素依賴性激酶5抗體 | CHO-K1(倉鼠卵巢細胞亞株) 5×106cells/瓶×2 |
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