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詳細介紹
兔神經(jīng)小膠質原代細胞
兔小膠質細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球,，大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由纖維或髓鞘構成的白質,。每一個半球都有三個面，即外側面(約占整個皮質面積的1/3),、內(nèi)側面和底面(占2/3的面積),；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回,，它們大大增加了大腦的表面積,；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂,、頂枕裂和中央溝,。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉,、頂葉,、顳葉、枕葉四大部分,。小膠質細胞是膠質細胞的一種,，相當于腦和脊髓中的巨噬細胞，是中樞系統(tǒng)(CNS)中的第一道也是主要的一道免疫防線,。小膠質細胞大約占大腦中的膠質細胞的20%,，小膠質細胞不停地清除著中樞系統(tǒng)中的損壞的，斑塊及感染性物質,。無數(shù)臨床上和病理學研究表明激活的小膠質細胞在退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用,，如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等,。但是過多激活或失控的小膠質細胞會引起毒性,。它們是促炎因子和氧化應激的重要來源，如腫瘤壞死因子(TNF)，一氧化氮,，白介素等有毒性的物質,。小膠質細胞的主要功能：①膠質出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉化的過程中；②當程序性細胞死亡時,，或在大腦發(fā)育的過程中,，中樞系統(tǒng)受損或受到病理損壞時，膠質可做為大腦的巨噬細胞,；③膠質細胞能在Ⅱ類組織相容性復合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原,，能進行Fc介導的巨噬作用，并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原,。
英文名稱 | Rabbit Microglia Cells | 組織來源 | 腦 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8423 |
細胞形態(tài) | 梭形,、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔神經(jīng)小膠質細胞
組織來源：腦
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：梭形、多角形
傳代特性：屬于終末分化細胞,；屬于不增殖細胞群
消化液：（12mM）
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
兔小膠質細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的兔小膠質采用酶消化法結合差速貼壁法，在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細胞制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
實驗室分離的兔小膠質經(jīng)CD11b免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
小鼠垂體瘤細胞;GT1-1 | FAM55D蛋白抗體 |
G蛋白β5/Gβ 5 抗體 | 酸化自噬相關蛋白4D抗體 |
蛋白激酶AKT1,2,3抗體 | Fas活化激酶結構域蛋白1抗體 |
腺苷酸環(huán)化酶8抗體 | FAM55D蛋白抗體 |
Fas活化激酶結構域蛋白1抗體 | 酸化自噬相關蛋白4D抗體 |
BTC Others Human 人 BTC / Betacellulin 人細胞裂解液 (陽性對照) | IL2RA Others Mouse 小鼠 IL2RA / CD25 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人肺腺癌細胞;Calu-3 | PRLR Others Rat 大鼠 PRLR / Prolactin receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人臍帶間葉干細胞(臍帶)(HUMSC) (5×105) AGS人胃腺癌細胞 Human | MYOC Others Human 人 MYOC / Myocilin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EDA2R Others Human 人 EDA2R / XEDAR / TNFRSF27 人細胞裂解液 (陽性對照) | CD84 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD84 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞(彝族);HYL | 兔神經(jīng)小膠質原代細胞Fas活化激酶結構域蛋白1抗體 |
CDC37 Others Human 人 CDC37 / CDC37A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 人絨毛間充質成纖維細胞 |
犬胸腺細胞;cf2Th | hMo-PB single 人類外周血單核細胞團塊單一來源,，預選型 > 1 mio.cells 人表皮黑色素細胞-中色素RNAHEM-m miRNA5 μg |
正常小鼠Leydig細胞;TM3 小鼠子宮頸上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 肝細胞核因子3抗體 |
腺苷酸環(huán)化酶8抗體 | NPC2 Others Human 人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
G蛋白β5/Gβ 5 抗體 | 蛋白激酶AKT1,2,3抗體 |
肝細胞核因子3抗體 | BTC Others Human 人 BTC / Betacellulin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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