詳細(xì)介紹
兔神經(jīng)干原代細(xì)胞
兔干細(xì)胞分離自腦皮層組織,;大腦分左右兩個(gè)半球,,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是元胞體集中的地方,。內(nèi)部則是由纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì),。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積),;半球表面有很多深淺不等的溝或裂,,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積,;大腦外側(cè)面重要的溝,、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝,。由于三溝裂之界隔,,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉,、顳葉,、枕葉四大部分。干細(xì)胞具有分化為元,、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力,,能自我更新,并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞群,。干細(xì)胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細(xì)胞,,它可以通過不對(duì)等的分裂方式產(chǎn)生組織的各類細(xì)胞。需要強(qiáng)調(diào)的是,,在腦脊髓等所有組織中,,不同的干細(xì)胞類型產(chǎn)生的子代細(xì)胞種類不同,分布也不同,。干細(xì)胞作為干細(xì)胞的一種,,它具有其它所有干細(xì)胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,,具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細(xì)胞的能力,,這種自我更新和分化潛能可以維持相當(dāng)長的時(shí)間甚至終生,對(duì)損傷和疾病具有反應(yīng)能力,。干細(xì)胞在疾病,、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移,,并向細(xì)胞,、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化的能力,已成為系統(tǒng)損傷修復(fù)和再生研究的熱點(diǎn),,體外建立穩(wěn)定的干細(xì)胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提,。干細(xì)胞在培養(yǎng)3-4d后,可形成球,,球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長,,予以更換半量培基,1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的球和單細(xì)胞懸液,,將部分細(xì)胞接種到新的培養(yǎng)瓶中,,2×105個(gè)細(xì)胞/瓶,每7-10d傳代1次,,每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次,,培養(yǎng)條件不變。
英文名稱 | Rabbit Neural Stem Cells | 組織來源 | 腦 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7997 |
細(xì)胞形態(tài) | 球形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔神經(jīng)干細(xì)胞
組織來源:腦
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含B-27 Supplement,、EGF、bFGF,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài):球形
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%,Accutase
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
兔干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔干采用消化后差速貼壁,,結(jié)合干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM [COLO320DM] 大鼠腎小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 酸化細(xì)胞角蛋白18抗體 |
酸化紅細(xì)胞生成素受體抗體 | 轉(zhuǎn)移生長因子β受體1抗體(TGF-βRⅠ,,TGFβRⅠ) |
腫瘤易感基因101蛋白抗體 | 酸化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 |
轉(zhuǎn)化生長因子β4抗體TGF β4 | 酸化細(xì)胞角蛋白18抗體 |
酸化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 | 轉(zhuǎn)移生長因子β受體1抗體(TGF-βRⅠ,,TGFβRⅠ) |
MLTC-1 小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 | 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) |
人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z 大鼠腎上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | NG108-15 大鼠小鼠雜合膠質(zhì)瘤細(xì)胞 |
H4 人膠質(zhì)細(xì)胞瘤 | TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 |
Raji,人Butt's淋巴瘤細(xì)胞 | 人心臟成纖維細(xì)胞-心室裂解物HCF-av L |
RKO-E6人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞 Human colon cancer RKO-E6 ansgenic cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | 兔神經(jīng)干原代細(xì)胞酸化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 |
人母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17 | 人肝永生化細(xì)胞;THLE-3 人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
CD53 Others Mouse 小鼠 CD53 (aa 107-181) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | CM-M002小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞 Rattus | 酸化周期素依賴性激酶2抗體 |
轉(zhuǎn)化生長因子β4抗體TGF β4 | 豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL1 |
酸化紅細(xì)胞生成素受體抗體 | 腫瘤易感基因101蛋白抗體 |
酸化周期素依賴性激酶2抗體 | MLTC-1 小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 |