詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
細(xì)胞屬性:
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔三叉星形膠質(zhì)采用消化法結(jié)合差速貼壁法篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔三叉星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 兔三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞 | 組織來源 | 腦 |
英文名稱 | Rabbit Trigeminal Astrocyte Cells | 貨號(hào) | YS-01X8421 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔三叉星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自三叉組織,;三叉為粗大的混合性腦,含一般軀體感覺和特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)兩種纖維,。其特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)纖維起于腦橋中段的三叉運(yùn)動(dòng)核,,纖維組成三叉運(yùn)動(dòng)根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,,位于感覺根下內(nèi)側(cè),,后進(jìn)入三叉第3支下頜中,經(jīng)卵圓孔出顱,,隨下頜分支分布于咀嚼肌等,。運(yùn)動(dòng)根內(nèi)還含有三叉中腦核有關(guān)的纖維,主要傳導(dǎo)咀嚼肌的本體感覺,。三叉內(nèi)以軀體感覺纖維為主,,這些纖維的細(xì)胞體位于三叉節(jié)(半月節(jié))內(nèi),該節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉壓跡處,,為硬腦膜形成的美克爾腔包裹,。膠質(zhì)細(xì)胞是組織中除元以外的另一大類細(xì)胞,也有突起,,但無樹突和軸突之分,,廣泛分布于中樞和周圍系統(tǒng)。在哺乳類動(dòng)物中,,膠質(zhì)細(xì)胞與元的細(xì)胞數(shù)量比例約為10:1,。在中樞系統(tǒng)(CNS)中的膠質(zhì)細(xì)胞主要有星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞(與前者合稱為大膠質(zhì)細(xì)胞)和小膠質(zhì)細(xì)胞等,。傳統(tǒng)認(rèn)為膠質(zhì)細(xì)胞屬于結(jié)締組織,,其作用僅是連接和支持各種成分,其實(shí)膠質(zhì)還起著分配營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),、參與修復(fù)和吞噬的作用,,在形態(tài)、化學(xué)特征和胚胎起源上都不同于普通結(jié)締組織。星形膠質(zhì)前體細(xì)胞主要表達(dá)Vimentin,,而成熟之后表達(dá)Vimentin和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP),,故GFAP被認(rèn)為是星形膠質(zhì)細(xì)胞成熟的標(biāo)志物。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形,、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
兔三叉星形膠質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,,每次3min,。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán),。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),,以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
公司產(chǎn)品:
MC38小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 MC38 mouse colon cancer cells DMEM+10%FBS | 酸化細(xì)胞角蛋白17抗體 |
酸化紅細(xì)胞膜條帶4.1蛋白抗體 | 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β5抗體 |
腫瘤易感候選基因3抗體 | 酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體 |
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1抗體 | 酸化細(xì)胞角蛋白17抗體 |
酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體 | 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β5抗體 |
HBEGF Protein Human 重組人 HBEGF / D 蛋白 | A172人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 A172 human glioblastoma cells DMEM+10% FBS |
CRT細(xì)胞,,膠質(zhì)瘤細(xì)胞 黑曲霉 人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞RNAHA-h miRNA5 μg | RTE(大鼠氣管上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
大鼠淋巴成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
SP2/0-Ag14細(xì)胞,,鼠骨髓瘤細(xì)胞 BALB/3T3(BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞) 人羊膜細(xì)胞;WISH | 兔三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體 |
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3 | REG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
GT1.1細(xì)胞,小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長(zhǎng)激素分泌激素) 人卵巢癌細(xì)胞系,Anglne細(xì)胞 人骨骼肌細(xì)胞裂解物HSkMCL | 黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基MelM |
SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1 | 酸化周期素依賴激酶2抗體 |
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1抗體 | 人成纖維細(xì)胞;HFF |
酸化紅細(xì)胞膜條帶4.1蛋白抗體 | 腫瘤易感候選基因3抗體 |
酸化周期素依賴激酶2抗體 | HBEGF Protein Human 重組人 HBEGF / D 蛋白 |