詳細介紹
兔軟骨原代細胞
兔軟骨細胞分離自關(guān)節(jié)軟骨組織,;關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨,,表面光滑,、呈淡藍色,、有光澤,,它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架,,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,,其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上,,上端朝向關(guān)節(jié)面,這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來而不會掉下來,,同時當受到壓力時候,,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用,。在這些纖維之間,,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,,這些軟骨細胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝,。關(guān)節(jié)軟骨沒有支配,也沒有血管,,其營養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得,,而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中,關(guān)節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關(guān)節(jié)運動,,使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,,所以關(guān)節(jié)運動對于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用,。關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層,,單個分布,、體積較小、呈橢圓形,,長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行,,越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形,、染色淺,,細胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴,。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),,這些關(guān)節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群,。電鏡下,,關(guān)節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體,。在組織切片中,,關(guān)節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙,。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
英文名稱 | Rabbit Chondrocyte Cells | 組織來源 | 軟骨組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7155 |
細胞形態(tài) | 梭形,、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔軟骨細胞
組織來源:軟骨組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
方法簡介
公司實驗室分離的兔關(guān)節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合蛋白酶消化制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的兔關(guān)節(jié)軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
SW 1990人胰腺癌細胞系 1990 human pancreatic cancer cell line SW L-15+10%FBS | 酸化細胞間粘附分子1抗體 |
酸化黑色素瘤細胞粘附分子CD146抗體 | 轉(zhuǎn)移生長因子β3抗體(TGFβ3) |
腫瘤抑制轉(zhuǎn)移候選基因3抗體 | 酸化熱休克蛋白90α抗體 |
轉(zhuǎn)化生長因子β1結(jié)合蛋白抗體 | 酸化細胞間粘附分子1抗體 |
酸化熱休克蛋白90α抗體 | 轉(zhuǎn)移生長因子β3抗體(TGFβ3) |
CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 | MDA-MB-435 人癌高轉(zhuǎn)移細胞 |
Calu-6人退行性癌細胞 Calu-6 human degenerative cancer cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | HGF Protein Human 重組人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 |
CL-0417QG-56(人肺扁平上皮癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 草魚腎細胞;GIK |
CFPAC-1 人胰腺癌細胞 | CL-0162MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2 |
H.A.細胞,,羊膜細胞 小兒細胞,HFF細胞 人張氏肝細胞;Chang liver | 兔軟骨原代細胞酸化熱休克蛋白90α抗體 |
肺大動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | THC-8307細胞,,人高分化結(jié)腸腺癌細胞系 人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細胞,OCM-1A細胞 綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞;MGC803-GFP |
IFNW1 Others Human 人 Ierferon omega-1 / IFNω / IFNW1 人細胞裂解液 (陽性對照) | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0908 |
CL-0380MDA-MB-157(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 酸化周期素E抗體 |
轉(zhuǎn)化生長因子β1結(jié)合蛋白抗體 | 人細胞HM |
酸化黑色素瘤細胞粘附分子CD146抗體 | 腫瘤抑制轉(zhuǎn)移候選基因3抗體 |
酸化周期素E抗體 | CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 |