詳細介紹
兔全骨髓原代細胞
兔全骨髓細胞分離自骨髓,;骨髓是機體的造血組織,,位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用,,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌,、病毒等,;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,,骨髓不但是造血器官,,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,,稱為紅骨髓,。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,,隨著年齡增大,,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。全骨髓細胞即骨髓內(nèi)除紅細胞外的全部細胞。
英文名稱 | Rabbit Whole Bone Marrow Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8419 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔全骨髓細胞
組織來源:骨髓
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細胞形態(tài):圓形
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
兔全骨髓細胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的兔全骨髓細胞采用沖洗骨髓,、紅細胞裂解法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔全骨髓經(jīng)過檢測,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細胞直接離心收集,,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFP | FAM129B蛋白抗體 |
核苷酸結合蛋白2抗體 | 酸化自噬相關蛋白9A抗體 |
腺苷三酸結合盒轉(zhuǎn)運體9抗體 | FK506結合蛋白38抗體 |
腺苷酸環(huán)化酶9抗體 | FAM129B蛋白抗體 |
FK506結合蛋白38抗體 | 酸化自噬相關蛋白9A抗體 |
EPD5 Others Human 人 EPD5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | RH-35(大鼠肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H7N8 (A/mallard/Netherlands/33/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
人肺轉(zhuǎn)化細胞;AE1201 | 人結腸平滑肌細胞(HCSMC)(5×105 ) |
EPHB4 Others Mouse 小鼠 EPHB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) | ADAMTSL1 Others Human 人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
FGFR4 Others Human 人 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) | 家豬皮膚細胞;SSC-S1 癌細胞,ZR-75-1細胞 NS1細胞,,小鼠骨髓瘤細胞 |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;HH-29 | 兔全骨髓原代細胞FK506結合蛋白38抗體 |
293T/17細胞,,SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞(亞系) 鼠小腦細胞,C8-D1A細胞 CL-0259BC-020(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 人口腔角質(zhì)細胞HOK |
人成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | DPYS Others Human 人 DPYS / Dihydropyrimidinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
ESAM Others Human 人 ESAM 人細胞裂解液 (陽性對照) | 核仁纖維蛋白抗體 |
腺苷酸環(huán)化酶9抗體 | K-562人慢性髓原白血病細胞 K-562 chronic myelogenous leukemia cells 1640+10% FBS |
核苷酸結合蛋白2抗體 | 腺苷三酸結合盒轉(zhuǎn)運體9抗體 |
核仁纖維蛋白抗體 | EPD5 Others Human 人 EPD5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。